ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
基質(zhì)金屬蛋白酶3ELISA試劑盒免費(fèi)代測 | matrix metalloproteinase 3 | FS-P65357 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
艾滋病病-1包膜糖蛋白抗體產(chǎn)品別名: 4-甲噠麥芽(標(biāo)準(zhǔn)品)
艾滋病病抗體產(chǎn)品別名: N N'-二乙乙二滿山白(標(biāo)準(zhǔn)品)
艾滋病病-1包膜糖蛋白抗體產(chǎn)品別名: 2-溴-3-氟苯滿山紅(標(biāo)準(zhǔn)品)
磷化組蛋白H3抗體產(chǎn)品別名: 一縮二蔓荊子黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)
短鏈L-3羥烷輔酶A脫氫酶抗體(小鼠,大鼠)產(chǎn)品別名: 丁正辛酯芒果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)
同源盒蛋白HOXD10抗體產(chǎn)品別名: 3-嗎啉酮芒果葉(標(biāo)準(zhǔn)品)
HHIP樣蛋白1抗體產(chǎn)品別名: 4,6-二甲-2-羥嘧啶莽草(標(biāo)準(zhǔn)品)
HOXA10抗體產(chǎn)品別名: 4-N-叔丁氧羰-4-N-甲氨哌啶貓爪草(標(biāo)準(zhǔn)品)
促黃體生成素受體抗體產(chǎn)品別名: 苯甲二甲腙毛大丁草(標(biāo)準(zhǔn)品)
HER2受體抗體(N端)產(chǎn)品別名: 巰-4-氨-6-羥嘧啶毛冬青(標(biāo)準(zhǔn)品)
HER2受體抗體產(chǎn)品別名: 2-氟-5-羥毛冬青皂苷A
A型病H7N9 M1蛋白抗體產(chǎn)品別名: (R)-(-)-2-芐-1-苯乙毛萼結(jié)晶甲;毛萼晶A
人絨毛膜促性腺激素α亞/hCG α 抗體產(chǎn)品別名: O-磷乙毛萼乙素
乙酰肝素酶抗體產(chǎn)品別名: 2-羥吡啶-5-毛鉤藤堿
組蛋白H3樣蛋白抗體產(chǎn)品別名: 1,5-己二烯-3,4-二毛訶子(標(biāo)準(zhǔn)品)
基質(zhì)金屬蛋白酶3ELISA試劑盒免費(fèi)代測Human PTRHD1 (Putative peptidyl-tRNA hydrolase PTRHD1) ELISA KIT普雷恩毛霉拉丁屬名: Mucor prainii
Human PEMT (Phosphatidylethanolamine N-methyltransferase) ELISA KIT大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
Human SLC51B (Organic solute transporter subunit beta) ELISA KIT杏鮑菇注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human OAZ1 (Ornithine decarboxylase antizyme 1) ELISA KIT白淺灰鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces albogriseolus
Human GPNMB (Transmembrane glycoprotein NMB) ELISA KIT美澳型核果褐腐病菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human OXGR1 (2-oxoglutarate receptor 1) ELISA KIT玫瑰色庫克菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human ELN(Elastin) ELISA Kit大腸埃希菌拉丁屬名: coli
Human OSCAR (Osteoclast-associated immunoglobulin-like receptor) ELISA KIT雷氏普羅菲登斯菌拉丁屬名: Providencia rettgeri
Human ODF3L1 (Outer dense fiber protein 3-like protein 1) ELISA KIT塔賓曲霉拉丁屬名: Aspergillus tubingensis
Human OMD(Osteomodulin) ELISA Kit果生鏈核盤菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)