Bst 4.0 Basic Bead

商品屬性：

商品介紹：

該制品為全體系凍干微球制品，內(nèi)含恒溫擴增所用的反應(yīng)緩沖液、Mg2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶等，其不包含任何染料，使用時只需要加入引物、模板即可進行核酸恒溫擴增。Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶具有依賴于 RNA 模板的聚合酶活性（逆轉(zhuǎn)錄），還具有依賴于DNA 的聚合酶活性，因此無論 DNA 或 RNA 樣本均可使用該制品進行恒溫擴增。該制品是進行 LAMP 及RT-LAMP 擴增反應(yīng)的試劑。

本制品不包含任何顯色染料，可自行搭配相關(guān)染料或檢測手段進行 LAMP 反應(yīng)，包括搭配 OG 染料管進行橙綠變色、搭配標(biāo)記 Oligo 進行試紙條檢測、搭配熒光染料進行熒光檢測、搭配 Molecular Beacon 探針進行熒光檢測等方法。

儲存：-20℃保存 2 年；室溫（25℃）保存>6 個月。

使用方法：（進行 LAMP 橙綠變色擴增）：

1. 關(guān)于 OG 橙綠變色管說明：橙綠變色染料（OG Dye）以烘干的形式預(yù)加在8聯(lián)管蓋上。LAMP反應(yīng)完畢后，將 0.2ml EP 管顛倒溶解 OG 染料后。LAMP的反應(yīng)產(chǎn)物將與 OG 染料形成綠色肉眼可見變色反應(yīng)（陽性），而未擴增的 EP 管為深橙色（陰性）。本試劑管常溫長期保存。

2. 配制變色 LAMP 反應(yīng)體系

在 OG 染料管（0.2ml EP）反應(yīng)管中加入下述試劑

Bst4.0 Basic Bead 1 粒

10xLAMP Primer Mix 2.5 μl

模板 DNA/RNA X μl

ddH2O 到總體積 25 μl

10xLAMP Primer Mix 濃度：FIP/BIP 分別為 16 μM、

注意：全部試劑加入完畢后，輕彈 EP 管底部后，再蓋上 OG 橙

3. 反應(yīng)體系配好后，置于 65°C 進行反應(yīng) 15~30min。（擴增良好的引物組合，通常 20min 即可變色，一般不超過30min）。

4. 觀察結(jié)果：反應(yīng)結(jié)束后，從加熱裝置中將反應(yīng)管取出，室溫 2min，使整個反應(yīng)管冷卻下來。再次用力將反應(yīng)管

注意：

（1）觀察結(jié)果時，盡可能不要與配制反應(yīng)空間共用，以防止污染操作臺。

（2）盡管  選取的為高密封

注意事項：

（1）關(guān)于礦物油的使用，在配制完 LAMP 反應(yīng)體系后，可加入一滴礦物油覆蓋于反應(yīng)液上部，以減少氣溶膠的污

（2）在使用其它熒光染料時，使用濃度可自行優(yōu)化，通染料可能導(dǎo)致擴增失敗。

（3）本試劑不支持，濁度、pH 變色、HNB 變色反應(yīng)，請勿嘗試。

（4）關(guān)于 LAMP 成品試劑的建議， 凍干球和 OG 橙綠變色管均為室溫穩(wěn)定狀態(tài)，可長期保存。將擴增引物加入到 OG 橙綠變色管底部，于 70°C 烘干，再加入一粒凍干球即可制備成全體系檢測試劑。

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