商品介紹：
產(chǎn)品名稱 | HBVAF人腦血管外膜成纖維細胞 | 貨號 | A01X2599 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | HBVAF |
分類 | 人細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞凍存注意事項：
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候，這時細胞生長狀態(tài)好，細胞數(shù)量也多，并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸，活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產(chǎn)品：
Kim-1 ELISA Kit 大鼠腎損傷分子1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-TSLP 基質(zhì)淋巴細胞生成素-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh GFOD2 葡萄糖果糖還原酶2抗體 規(guī)格 0.2ml
u-T3(Mouse Ultrasensitivity Tri-iodothyronine) ELISA KIT 小鼠高敏狀腺原酸 96T
NALP4 英文名稱： 癌/抗原58抗體 0.1ml
Binding Inhibitor 英文名稱： 乙酰結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
Anti-TSLP 基質(zhì)淋巴細胞生成素-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
EPI ELISA Kit 大鼠Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-UCP-1 線粒體脫偶連蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh GCN2 蛋白激酶GCN2蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Bid ELISA Kit 大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導蛋白 96T
NALP2 英文名稱： 富含亮酸重復結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 0.1ml
APBB1 interacting protein 1 英文名稱： β淀粉樣蛋白前體結(jié)合蛋白B-1抗體 0.2ml
Anti-UCP-1 線粒體脫偶連蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ADAM8 ELISA Kit 大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-TSHR (NT) 促甲狀腺素受體抗體(N端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh GFP 綠色熒光蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
MAP-2(Human microtubule-associated protein 2) ELISA Kit 人微管相關(guān)蛋白2 96T
NALP12 英文名稱： NALP12抗體 0.2ml
AICDA 英文名稱： 活化誘導胞嘧啶核苷脫酶抗體 0.2ml
Anti-TSHR (NT) 促甲狀腺素受體抗體(N端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Human keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit 人角化細胞內(nèi)分泌因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
HBVAF人腦血管外膜成纖維細胞Anti-SSTR2 受體2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的羊抗人IgM 規(guī)格 0.1ml
eNOS(Mouse Endothelial nitric oxide synthase) ELISA Kit 小鼠內(nèi)皮型合成酶 96T
NAIP 英文名稱： 神經(jīng)細胞凋亡抑制蛋白抗體 0.2ml
BCAT2 英文名稱： 支鏈基酸轉(zhuǎn)酶2抗體 0.1ml
Anti-SSTR2 受體2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
UK ELISA Kit 大鼠Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Thioster-containing protein 1 按蚊硫酯包含蛋白-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
Rhesus antibody Rh GNA12/G protein alpha 12 鳥苷酸調(diào)節(jié)蛋白12抗體 規(guī)格 0.1ml
GRO Beta/CXCL2/MGSA(Human growth-regulated oncogene Beta/melanoma growth stimulating activity) ELISA Kit 人生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生激因子 96T
NAIF1 protein 英文名稱： 核凋亡誘導因子蛋白1 0.2ml
ARPC1A 英文名稱： 肌動蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型1A抗體 0.2ml
Anti-Thioster-containing protein 1 按蚊硫酯包含蛋白-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng)：取6cm細胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細胞長滿之后，提取細胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。
