公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
商品介紹:
產(chǎn)品名稱 | ZR-75-1+luc人乳腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 | 貨號(hào) | A01X1023 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | ZR-75-1+luc |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時(shí)候,這時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時(shí)方法和平時(shí)一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對(duì)特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會(huì)好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí),再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長(zhǎng)期保存。
(4) 儲(chǔ)存環(huán)境
細(xì)胞長(zhǎng)期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲(chǔ)少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時(shí),吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長(zhǎng)滿之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗(yàn)證敲減/過表達(dá)效率。
公司正在出售的產(chǎn)品:
ACV-A ELISA Kit 大鼠活化素AMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Bcl-6/Bcl-5/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠原癌基因Bcl-6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ERR-alpha 雌激素受體相關(guān)蛋白α抗體 規(guī)格 0.2ml
eNOS (Rabbit Endothelial nitric oxide synthase) ELISA Kit 兔內(nèi)皮型合成酶 96T
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AP2 alpha 英文名稱: 轉(zhuǎn)錄激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗體 0.1ml
Anti-Bcl-6/Bcl-5/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠原癌基因Bcl-6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ANG- II ELISA Kit 大鼠血管緊張素ⅡMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Bcl-10/CLAP/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠Bcl-10抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ERp29 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白29抗體 規(guī)格 0.1ml
ACE II ELISA Kit 大鼠血管緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化酶 96T
MYOM1 英文名稱: 肌間蛋白1抗體 0.2ml
ARHI 英文名稱: 抑癌基因ras同源家族1抗體 0.2ml
Anti-Bcl-10/CLAP/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠Bcl-10抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
KLH ELISA Kit 小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-BNP/FITC 熒光素標(biāo)記腦素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EphB2/Eph receptor B2 酪蛋白激酶受體B2抗體 規(guī)格 0.1ml
Rat Progesterone receptor,PROGR ELISA kit 小鼠孕酮受體 96T
Myoglobin 英文名稱: 肌紅蛋白抗體 0.1ml
ARSA 英文名稱: 芳香基酯酶1抗體 0.2ml
Anti-BNP/FITC 熒光素標(biāo)記腦素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CCB(Mouse calcium channel blockers) ELISA Kit 小鼠鈣通道阻滯劑Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Cbx8/FITC 熒光素標(biāo)記染色質(zhì)結(jié)合蛋白Cbx8抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EGFL8 表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白8抗體 規(guī)格 0.2ml
(Ntn1)ELISA Kit 大鼠軸突生長(zhǎng)誘向因子1 96T
Myogenin 英文名稱: 肌細(xì)胞生成素抗體 0.1ml
ZR-75-1+luc人乳腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記phospho-beta Actin (Tyr53) 英文名稱: 0酸化β-肌動(dòng)蛋白抗體 0.1ml
Anti-Cbx8/FITC 熒光素標(biāo)記染色質(zhì)結(jié)合蛋白Cbx8抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
(Mouse Gastrointestinalcancer Marker-CA199) ELISA Kit 小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CD158e/KIR3DL1/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞抑制性受體3DL1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-human IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格 0.1ml
HBeAg(立可讀) 乙型肝炎e抗原 96T
MyoGEF 英文名稱: 肌球蛋白相互作用G蛋白交換因子抗體 0.2ml
AMIGO2 英文名稱: 粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 0.2ml
Anti-CD158e/KIR3DL1/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞抑制性受體3DL1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml