商品介紹：
產(chǎn)品名稱 | U251 MG (KO)人類星形膠質(zhì)細胞瘤細胞 | 貨號 | A01X1006 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | U251 MG (KO) |
分類 | 人細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞凍存注意事項：
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候，這時細胞生長狀態(tài)好，細胞數(shù)量也多，并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸，活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產(chǎn)品：
GHRP-Ghrelin(Mouse growth hormone releasing peptide-Ghrelin) ELISA Kit 小鼠生長激素釋放肽ghrelinMulti-class antibodies規(guī)格： 96T
Anti-cath-D/CD /FITC 熒光素標記組織蛋白酶D抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh eIF3F 真核翻譯起始因子3F抗體 規(guī)格 0.1ml
PS ELISA Kit 小鼠0脂酰絲酸 96T
Myeloperoxidase/c-ANCA 英文名稱： 髓過氧化物酶抗中性粒細胞胞質(zhì)IgG抗體 0.1ml
Phospho-Ack1 (Tyr326) 英文名稱： 0酸化Ack1抗體 0.1ml
Anti-cath-D/CD /FITC 熒光素標記組織蛋白酶D抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
BMPs(Mouse bone morphogenetic proteins) ELISA Kit 小鼠骨形成蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CCK8/FITC 熒光素標記膽囊收縮素/縮膽囊素抗體(八肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh EGF(mouse) 表皮生長因子抗體(小鼠) 規(guī)格 0.1ml
Macrobrachium rosenbergii Nodavirus,MrNV ELISA Kit 羅氏沼蝦諾達病毒 96T
Myelin Protein Zero 英文名稱： 外周髓0脂P0蛋白/P0蛋白抗體 0.1ml
ABH1 英文名稱： ALKB蛋白抗體 0.2ml
Anti-CCK8/FITC 熒光素標記膽囊收縮素/縮膽囊素抗體(八肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
AsAb ELISA Kit 大鼠抗抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-AE3/FITC 熒光素標記陰離子交換蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FbxW2 FbxW2蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
TNF- Alpha(Human Tumor necrosis factor Alpha) ELISA KIT 人壞死因子α 96T
Myelin PLP 英文名稱： 髓0酯髓鞘蛋白1抗體 0.2ml
AKAP7 英文名稱： 蛋白激酶A錨定蛋白7抗體 0.2ml
Anti-AE3/FITC 熒光素標記陰離子交換蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
RBP-4(Mouse Retinol-binding protein 4) ELISA Kit 小鼠結合蛋白4Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CCL1/I-309/TCA3/FITC 熒光素標記嗜酸粒細胞趨化蛋白CCL1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh EGF(human) 表皮生長因子抗體(人) 規(guī)格 0.1ml
IFN- Beta/IFNB(Human Interferon Beta) ELISA Kit 人β干擾素 96T
U251 MG (KO)人類星形膠質(zhì)細胞瘤細胞MyD88 英文名稱： 髓樣分化蛋白抗體 0.1ml
ARPM1 英文名稱： 肌動蛋白相關蛋白M1抗體 0.2ml
Anti-CCL1/I-309/TCA3/FITC 熒光素標記嗜酸粒細胞趨化蛋白CCL1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
OT/BGP ELISA Kit 大鼠骨鈣素/骨谷蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-ATF4/FITC 熒光素標記活化轉錄因子4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh factor XIII 因子13抗體(纖維蛋白穩(wěn)定因子) 規(guī)格 0.2ml
BGP(Osteocalcin/Bone Gla-protein)ELISA Kit 兔骨鈣素 ELISA試劑盒 96T
Mycobacterium tuberculosis Ag85B 英文名稱： 桿菌抗體 0.2ml
ABCG2 英文名稱： 三0酸腺苷結合轉運蛋白G超家族成員2抗體 0.1ml
Anti-ATF4/FITC 熒光素標記活化轉錄因子4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng)：取6cm細胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉染后不利篩選細胞。
(2) 轉染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔細胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉染準備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉染：把A/B復合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉染后，可在48h-72h細胞長滿之后，提取細胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。
