商品介紹:
產(chǎn)品名稱 | TPC-1人乳頭狀甲狀腺癌細胞株 | 貨號 | A01X1000 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | TPC-1 |
分類 | 人細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞凍存注意事項:
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候,這時細胞生長狀態(tài)好,細胞數(shù)量也多,并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸,活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產(chǎn)品:
NKB ELISA Kit(Ret) 大鼠神經(jīng)肽BMulti-class antibodies規(guī)格: 96T
Anti-Bdkrb2/B2R/FITC 熒光素標記緩激肽B2受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ERK1/MAPK3 原活化蛋白激酶3抗體 規(guī)格 0.1ml
TARC/CCL17(Human thymus activation regulated chemokine) ELISA Kit 人活化調(diào)節(jié)趨化因子 96T
MX2 英文名稱: 干擾素誘導(dǎo)GTP結(jié)合蛋白MX2抗體 0.2ml
Adenylate kinase 2 英文名稱: 腺苷酸激酶2抗體 0.2ml
Anti-Bdkrb2/B2R/FITC 熒光素標記緩激肽B2受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
TRAIL-R4 ELISA Kit 大鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Anopheles stephensi protein 1/FITC 熒光素標記按蚊抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM96B FAM96B蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
TLR4 ELISA Kit 大鼠Toll樣受體4 96T
MVK 英文名稱: 甲羥激酶抗體 0.2ml
phospho-A Raf (Ser214) 英文名稱: 0酸化A-Raf抗體 0.1ml
Anti-Anopheles stephensi protein 1/FITC 熒光素標記按蚊抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
TRAIL-R1 ELISA Kit 大鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Annexin VI/FITC 熒光素標記膜粘連蛋白 VI抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM98A FAM98A蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
DAT ELISA Kit 大鼠多巴胺轉(zhuǎn)運蛋白 96T
MVD 英文名稱: 甲羥脫羧酶抗體 0.1ml
ASAH2 英文名稱: ?;蚀济擋C?抗體 0.2ml
Anti-Annexin VI/FITC 熒光素標記膜粘連蛋白 VI抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-GAD-65/FITC 熒光素標記谷脫羧酶-65抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Notch1/MOTC /FITC 熒光素標記跨膜受體蛋白Notch-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Brd4/CAP 染色體相關(guān)蛋白CAP抗體 規(guī)格 0.2ml
IRS-1 胰島素受體底物-1(抗原) 0.5mg
MV hemagglutinin glycoprotein 英文名稱: 麻疹病毒血凝素抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh RGS19 G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-Notch1/MOTC /FITC 熒光素標記跨膜受體蛋白Notch-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
sRANKL ELISA Kit 大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ATF6/FITC 熒光素標記活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
TPC-1人乳頭狀甲狀腺癌細胞株Rhesus antibody Rh Factor XII 因子12抗體 規(guī)格 0.2ml
AChE ELISA Kit 大鼠乙酰酯酶 96T
MUSK 英文名稱: 肌肉骨骼受體酪酸激酶抗體 0.1ml
ARP2/3 subunit 1B 英文名稱: 肌動蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合亞單位B1抗體 0.1ml
Anti-ATF6/FITC 熒光素標記活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng):取6cm細胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細胞長滿之后,提取細胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達效率。