我司供應的elisa進口試劑盒免費代測，全程ELISA試劑盒實驗技術(shù)指導，免費代做實驗，索取產(chǎn)品說明書。
規(guī)格：96T/48T
特點：靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領(lǐng)域科學研究，不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬：羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本：體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
產(chǎn)品名稱 | 小鼠泛素蛋白(Ub)elisa進口試劑盒 |
英文名稱 | Mouse ubiquitin protein (Ub) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G9852 |
備試劑與收集血樣：
1. 收集標本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時；更長時間須冷凍（ -20 ℃或 -70 ℃ ）保存，避免反復凍融。
2. 標準品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管，管加標本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復作對倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。
4. 洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）
檢測程序：
1. 加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備：
ELISA進口試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（2）血漿：
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?/font>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
FAM3D Protein Mouse 重組小鼠 FAM3D / Oit1 蛋白 (Fc 標簽)(3R,5S)氟伐他汀鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進口(3S,5R) Fluvastatin Salt
小鼠背部脊髓神經(jīng)元(MN-dsc)(1×106) DU 145, 人前列腺癌細胞 Human(3R,5S)-氟伐他汀鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進口(3R,5S)-Fluvastatin Salt
中國倉鼠卵巢細胞-二氫葉酸還原酶缺陷型;CHO/dhFr-氟伐他汀質(zhì)量規(guī)格：美國進口Fluvastatin
CHEK1 Others Human 人 CHK1 / CHEK1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 克林沙星鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進口Clinafloxacin
CL-0033BGC823(人胃癌細胞)5×106cells/瓶×2外消旋西他列汀質(zhì)量規(guī)格：美國進口rac-Sitagliptin
人膀胱平滑肌細胞裂解物HBdSMCLN-乙酰-5-甲氧基色，英文名或英文縮寫：Melatonin，級別：BR，99%，規(guī)格：25克
SDF2 Others Mouse 小鼠 SDF2 / SDF-2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 亮酸脫氫酶 Leucine Dehydrogenase (50 units/mg) 9082-71-7 1KU 通用試劑
小鼠骨髓瘤細胞;Fox-NY酰安;安基全 ForMcMidq;ForMic ccid cMidq;ForMylcMidq;cMidq C1 1972-1-7
SK-OV-3細胞，卵巢癌細胞 人胃癌細胞系,HS-746T細胞 豹貓肌肉成纖維樣細胞;LCM41,5-disulfonicacid阿姆斯特朗酸1克高，98%
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-4D6923-32-0DL-胱酸;DL-3,3′-二硫代雙(2-基酸); DL-雙硫代酸DL-Cystine;
EPHA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphA4 人細胞裂解液 (陽性對照) N-乙酰-L-蛋酸shēng huà shì jì容量：RT，避光25克
人神經(jīng)細胞HNS-(2-安基)溴化異流脲鎓輕溴醋鹽 2-(2-cminoqthyl)isothiourqc dixy7nobromidq 26-10-0
HL-60/Ad細胞，人白血病阿霉素耐藥株 小鼠單核巨噬細胞,J774A.1細胞 尿道上皮細胞培養(yǎng)基UCM藍色葡聚糖2000shēng huà shì jì容量：保存：-20℃1克
MDA-MB-468-06(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2Hugh-Leifson培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：25毫升
AtT-20(小鼠垂體瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R099大鼠表皮色素細胞*培養(yǎng)基100mL EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMY0904701-97-33-環(huán)己基Cyclohexanepropionic acid
小鼠泛素蛋白(Ub)elisa進口試劑盒RKO(人結(jié)腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2雷公藤甲素(標準品)Triptolide質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
Gibco 17005042 Keratinocyte-SFM (1X), Liquid(10724-011和37000015) 500ml雷公藤內(nèi)酯酮（標準品）Triptonide質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
人腎系膜細胞cDNAHRMC cDNA類葉升麻苷,毛蕊花糖苷（標準品）Acteoside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 人細胞裂解液 (陽性對照) 利卡靈-B(標準品)(-)-Licarin B質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
人軟骨細胞*培養(yǎng)基 100mL利血平(標準品)Reserpine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr；
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min；
3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min；
4.抗原修復： 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復，常采用高壓、微波（溫度達到 98~100℃）或酶消化修復法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復方法見附 1）* 注：有些抗原勿需修復，直接進入第 5 步封閉。
5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min；
6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜；
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min；
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育30 min；
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min；
12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37℃濕盒中孵育 30 min；
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）；
14.顯色：應用 DAB 溶液（試劑 F）顯色；
15.復染：自來水充分沖洗，復染，脫水，透明；
16.封片： 待組織標本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；
17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。
