ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | SS大鼠生長抑素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Rat Somatostatin, SS Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-R64572 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
有絲分裂控制樣蛋白DIS3L抗體英文全稱alkaloid英文簡稱alkaloid檢測范圍3156nmol/L-20ng/mL
DOM3Z蛋白抗體英文全稱GNA英文簡稱GNA檢測范圍3157nmol/L-20ng/mL
轉(zhuǎn)錄下調(diào)蛋白1抗體英文全稱Free Protein英文簡稱FP檢測范圍3158nmol/L-24μg/mL.
蓬亂蛋白2抗體英文全稱Organic phosphorus英文簡稱ORP檢測范圍3159nmol/L-8ng/mL
癌中心體相關(guān)蛋白抗體英文全稱SPFMV英文簡稱SPFMV檢測范圍3160nmol/L-32IU/L
DCAF13蛋白抗體英文全稱mild yellow edge virus英文簡稱MYEV檢測范圍3161nmol/L-
原鈣粘蛋白16抗體英文全稱amylum英文簡稱Amy檢測范圍3162nmol/L-16mg/mL
雌激素受體相關(guān)蛋白α抗體英文全稱NADP-Malic enzyme英文簡稱NADP-ME檢測范圍3163nmol/L-800ng/mL.
跨膜TMIGD1蛋白抗體英文全稱carbonic anhydrase β英文簡稱CA-β檢測范圍3164nmol/L-48U/L
胞漿接頭蛋白Dok5抗體英文全稱NADP-dependent malate dehydrogenase英文簡稱NADP-DMD檢測范圍3165nmol/L-640ng/mL.
胞漿接頭蛋白Dok6抗體英文全稱Pheophytin A英文簡稱Py-A檢測范圍3166nmol/L-400ng/ml
脫氫酶/還原酶家族成員2抗體英文全稱7-Hydroxycoumarin英文簡稱7-Hyd檢測范圍3167nmol/L-8ng/mL.
無胸腺癥關(guān)鍵蛋白6樣抗體(迪格奧爾格綜合征)英文全稱chlorophyll英文簡稱chlorophyll檢測范圍3168nmol/L-800μg/mL
軸絲動(dòng)力蛋白10抗體英文全稱β-Carotenoids英文簡稱β-Carotenoids檢測范圍3169nmol/L-80μg/mL
軸絲中鏈動(dòng)力蛋白抗體英文全稱coproporphyrinogen oxidase英文簡稱CPOX檢測范圍3170nmol/L-400U/L
軸絲動(dòng)力蛋白7抗體英文全稱Protoporphyrinogen Oxidase英文簡稱PPOX檢測范圍3171nmol/L-60U/L
小鼠網(wǎng)膜素(omentin)ELISA試劑盒 MKL1/MRTF-A Antibody100 ul
小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒PRMT7 (D1K6R) Rabbit mAb100 ul
小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒LARP1 Antibody100 ul
小鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒Vti1a (D8U3M) Rabbit mAb100 ul
小鼠一氧化氮(NO)ELISA試劑盒Phospho-Mcl-1 (Thr163) (D5M9D) Rabbit mAb100 ul
小鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒Noxa (D8L7U) Rabbit mAb100 ul
小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒XPC (D1M5Y) Rabbit mAb100 ul
小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒 IFIT1 (D2X9Z) Rabbit mAb100 ul
SS大鼠生長抑素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理磷化G蛋白激活內(nèi)向鉀通道1抗體1,4-Bis(2-benzoxazolyl)naphthalene別名: 分子式: C24H14N2O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白2抗體4,4'-Diaminodiphenylsulfone別名: 分子式: C12H12N2O2S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
間隙連接蛋白10抗體Dimethylolurea別名: 分子式: C3H8N2O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
間隙連結(jié)蛋白46/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體9,9-Bis(4-hydroxyphenyl)fluorene別名: 分子式: C25H18O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
間隙連結(jié)蛋白50/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體N,N'-Bis(salicylidene)ethylenediamine別名: 分子式: C16H16N2O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
間隙連結(jié)蛋白31.9抗體N,N'-Bis(2-hydroxyethyl)ethylenediamine別名: 分子式: C6H16N2O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
甘油激酶2抗體Bis(4-hydroxy-3,5-dimethylphenyl) sulfone別名: 分子式: C16H18O4S性狀: Cryst.純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
β-半乳糖苷酶1/β-Gal/彈性蛋白受體1抗體3,3'-Sulfonyldianiline別名: 分子式: C12H12N2O2S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)