產(chǎn)品名稱 | K562人慢性骨髓性白血病細胞系 | 貨號 | A01X803 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | K562:K562 |
分類 | 人細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹：
別稱 | K562 |
種屬 | 人類 |
年齡（性別） | 女性，53歲 |
組織來源 | 骨髓；慢性骨髓性白血病(CML) |
生長特性 | 懸浮細胞 |
細胞形態(tài) | 淋巴細胞樣 |
詳情簡介 | 連續(xù)細胞株K-562是由Lozzio從一位臨終的53歲女性慢性骨髓性白血病患者的胸水中建立。K-562細胞被歸入高度未分化的粒性白細胞類，Erson等對其表面膜性質(zhì)的研究表明，K-562細胞是一株人類紅白血病細胞。K-562細胞在自然殺傷分析中廣泛作為高敏感的體外受體，See Pross等將K-562細胞用于NK細胞的體外詳細檢測，包括NK細胞活性的數(shù)學量化。K-562母細胞是多能性造血惡性細胞，它能自發(fā)分化成可識別的紅血球祖細胞、粒性白細胞、單核細胞等。K-562細胞是EBNA陰性的。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | IMDM＋10% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 3×10^5-5×10^5cells/mL |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時間 | ~30-48小時 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣，95%；CO2，5% |
溫度 | 37℃ |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞凍存注意事項：
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候，這時細胞生長狀態(tài)好，細胞數(shù)量也多，并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸，活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
K562人慢性骨髓性白血病細胞系公司正在出售的產(chǎn)品：
C型鈉利尿多肽抗體 磷酸化核糖體S6激酶RSK2抗體 英文名；Phospho-RSK2 (Ser227)
DDX58抗體 磷酸化肌球蛋白輕鏈6抗體 英文名；phospho-MYL6 (Tyr29+Ser30)
DHX40蛋白抗體 磷酸化結(jié)節(jié)性硬化癥蛋白1抗體 英文名；phospho-TSC1 (Ser505)
DNAJB11蛋白抗體 磷酸化毛細血管擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗體 英文名；phospho-ATM (Ser1981)
APC anti-mouse I-Ab 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體 英文名；CCDC8
APC-Cy7標記小鼠CD117單克隆抗體 抗利尿激素/血管升壓素/加壓素/血管加壓素抗體 英文名；Vasopressin
APC標記人CD163單克隆抗體 可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白22A17抗體 英文名；SLC22A17
APC標記人CD57單克隆抗體 跨膜蛋白10抗體 英文名；OPALIN/TMEM10
APC標記小鼠CD25單克隆抗體 跨膜蛋白4超家族成員3抗體 英文名；TM4SF3
A-Raf 重組兔單克隆抗體 跨膜蛋白SEMA5B抗體 英文名；Semaphorin 5B
ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運家族蛋白13抗體 快速周期調(diào)節(jié)蛋白E5抗體 英文名；SPDYE5
ATP-依賴的RNA解旋酶p47抗體 賴氨酰氧化酶樣1抗體 英文名；LOXL1
A型流感病毒（H9N2）血凝素HA1抗體 類固醇5α還原酶1抗體(5α-Reductase 1) 英文名；SRD5A1
BCL10單克隆抗體 粒細胞分化相關(guān)標志物MYADM抗體 英文名；Myeloid Marker
6號染色體開放閱讀框211抗體 甲基化樣蛋白22抗體 英文名；METTL22
7號染色體開放閱讀框29抗體 甲羥戊酸激酶抗體 英文名；MVK
8號染色體開放閱讀框42抗體 甲狀腺激素受體相關(guān)蛋白復合物230樣蛋白抗體 英文名；MED12L
9號染色體開放閱讀框139抗體 鉀離子通道KIR2.3抗體 英文名；KIR2.3
9號染色體開放閱讀框66抗體 鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白20抗體 英文名；KCTD20
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng)：取6cm細胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細胞長滿之后，提取細胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。
