產(chǎn)品名稱 | JEG-3人絨毛膜癌細(xì)胞 | 貨號(hào) | A01X798 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | JEG3:JEG-3 |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
商品介紹：
別稱 | Jeg-3 |
種屬 | 人類 |
年齡（性別） | 男性 |
組織來源 | 胎盤病變；絨毛膜癌 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
詳情簡(jiǎn)介 | JEG-3細(xì)胞是一株超三倍體人類細(xì)胞株。JEG-3細(xì)胞的典型染色體數(shù)為71，發(fā)生率為34%，多倍體率為2.6%。t(4;11)(p15;q13)，i(13q)，t(10p15q)，del(18)(q21)和6個(gè)其他標(biāo)記在大多數(shù)細(xì)胞中常見，另有兩個(gè)標(biāo)記在一些細(xì)胞中可見，在一個(gè)N14和兩個(gè)N22中可見大衛(wèi)星。N2、N5和N9有4個(gè)拷貝，而N7、N13、N18、N21和X為單拷貝，Q-帶檢測(cè)法可以檢測(cè)到單個(gè)Y染色體。 |
生物安全等級(jí) | 1 |
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 | MEM＋10% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時(shí)間 | ~24-36小時(shí) |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣，95%；CO2，5% |
溫度 | 37℃ |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)：
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時(shí)候，這時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時(shí)方法和平時(shí)一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對(duì)特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會(huì)好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí)，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長(zhǎng)期保存。
(4) 儲(chǔ)存環(huán)境
細(xì)胞長(zhǎng)期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲(chǔ)少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。
JEG-3人絨毛膜癌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：
Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白4抗體 間隙連接蛋白31.1/GJB5抗體 英文名；Connexin 31.1
ADP核糖基化樣因子ARL3抗體 剪接體相關(guān)蛋白155抗體 英文名；SAP155
AF488標(biāo)記人CD25單克隆抗體 劍蛋白p80抗體 英文名；katanin p80
AF647標(biāo)記人CD158e1單克隆抗體 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白GBAS抗體 英文名；GBAS
AF680標(biāo)記的叉頭蛋白P3抗體 酵母肌動(dòng)蛋白（內(nèi)參）抗體 英文名；Beta Actin (Yeast, Loading Control)
11號(hào)染色體開放閱讀框67抗體 核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子YY1 （核內(nèi)參）重組兔單克隆抗體 英文名；YY1(Nuclear Loading Control)
14-3-3E蛋白抗體 黑色素瘤蛋白多糖4抗體 英文名；NG2
17β羥基類固醇脫氫酶11/17β-HSD11抗體 黑色素瘤相關(guān)抗原D4抗體 英文名；MAGD4
19號(hào)染色體開放閱讀框29抗體 環(huán)指蛋白212抗體 英文名；RNF212
1號(hào)染色體開放閱讀框105抗體 環(huán)指蛋白67抗體 英文名；NEURL
1號(hào)染色體開放閱讀框167抗體 磺胺抗體 英文名；Sulfadiazine
1號(hào)染色體開放閱讀框229抗體 活化轉(zhuǎn)錄因子4重組兔單克隆抗體 英文名；ATF4
1號(hào)染色體開放閱讀框96抗體 肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白2B抗體 英文名；CORO2B
20號(hào)染色體開放閱讀框177抗體 肌動(dòng)蛋白依賴染色質(zhì)調(diào)控因子SMARCD3蛋白抗體 英文名；SMARCD3
21號(hào)染色體開放閱讀框33抗體 肌球蛋白1B抗體 英文名；MYO1B
鋅指蛋白14抗體 小鼠抗人CD20單克隆抗體 英文名；human CD20
鋅指蛋白200抗體 心肌缺血預(yù)處理正調(diào)節(jié)蛋白2抗體 英文名；WDR26
鋅指蛋白24抗體 鋅指MIZ結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 英文名；ZMIZ2
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時(shí)，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長(zhǎng)滿之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗(yàn)證敲減/過表達(dá)效率。
