Denhardt 溶液,50×100mL哪里有賣的詳細(xì)介紹:
DNA提取流程圖:
?公司Denhardt 溶液,50×100mL哪里有賣的RNA/DNA提取目錄有下面10個系列,5000余種產(chǎn)品:點擊了解更探針標(biāo)記及檢測。
1、RNA純化系列產(chǎn)品
2、DNA純化系列產(chǎn)品
3、電泳及回收系列產(chǎn)品
4、探針標(biāo)記及檢測系列產(chǎn)品
5、核酸擴增系列產(chǎn)品
6、克隆表達系列產(chǎn)品
7、基因組研究系列產(chǎn)品
8、蛋白質(zhì)研究系列產(chǎn)品
9、細(xì)胞生物學(xué)研究系列產(chǎn)品
10、即用型溶液、質(zhì)粒庫、菌種庫等等
實驗步驟:
(1)Denhardt 溶液,50×100mL哪里有賣實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::(25:24:1)抽提兩次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
問:常用的DNA 濃度及純度檢測方法有哪些?
Denhardt 溶液,50×100mL哪里有賣稱答:回收得到的DNA段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過對比定量的Marker 來定量濃度;紫外分光檢測OD260/280 比值,OD260/280 比值在1.7-1.9 之間說明所得 DNA 純度較好,如果洗脫時不使用溶液Eluent而使用去離子水,比值會偏低,因為pH 值和離子存在會影響光吸收值,但不表示純度低。
問:長片段回收時應(yīng)注意哪些問題?
答:Denhardt 溶液,50×100mL哪里有賣當(dāng)DNA 段長度較長(5 kb 以上)時,回收效率會有所下降,這是DNA 切膠回收時的常見現(xiàn)象。此時建議按以下方法解決問題:
1 適當(dāng)增加待回收DNA 樣品的點樣量;
2 由于長段DNA 不易從樹脂上洗脫下來,建議洗脫兩次,可以提高洗脫效率;
3 減少操作過程中對長段DNA 的物理損傷,如混合振蕩操作不要過于劇烈,切膠時不要將DNA 長時間暴露在紫外等下。
注意事項:
● Denhardt 溶液,50×100mL哪里有賣溶液PE *次使用前請按瓶上標(biāo)簽加入4 倍體積的無水乙醇,即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 無水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無水乙醇,使用后立即蓋緊蓋子。
● 本產(chǎn)品對電泳使用的Agarose 種類沒有嚴(yán)格限制,可以使用普通Agarose 。為了保證回收DNA 的質(zhì)量和DNA 回收效率,希望使用高純度的Agarose ,但沒有必要一定要使用低熔點的Agarose 等。
● 電泳時請使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液,以免影響電泳及回收效果。
● 請適當(dāng)延長電泳時間,在條帶分離清晰后進行切膠回收,以免回收到多余雜帶。
● 為提高DNA 回收收率,切膠時應(yīng)盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強。但如果DNA 濃度小,或DNA 初始量少,回收率將會偏低。
● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA段可直接用于各種酶促反應(yīng)等,不會影響后續(xù)試驗。
● 為了保證回收效率,請不要使用未調(diào)整pH 值的超純水洗脫目的段。
● 請嚴(yán)格按照操作步驟操作。
羅布麻寧;夾竹桃麻素 Acetovanillone 498-02-2 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
輪環(huán)藤寧四酸/1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四酸 Tetraxetan/DOTA/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid 60239-18-1 質(zhì)量規(guī)格:>95%
輪環(huán)藤寧/1,4,7,10- 四氮雜環(huán)十二烷 Cyclen/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane 294-90-6 質(zhì)量規(guī)格:含量≥99%(GC)
卵清蛋白;雞蛋白蛋白 Ovalbumin/Egg albumins 9006-59-1 質(zhì)量規(guī)格:BR,80~90%
路路通酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Liquidambaric acid 4481-62-3 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
路路通內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Liquidambaric lactone 185051-75-6 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
镥標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml in 10%HCl) Lutetium standard 7439-94-3 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml in 10%HCl
魯斯考皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品) Ruscogenin 472-11-7 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
魯米諾(>98%,BS) Luminol, sodium salt 20666-12-0 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BS
魯米諾,發(fā)光氨 luminol 521-31-3 質(zhì)量規(guī)格:>98%
魯比替康; 9-基喜樹堿 Rubitecan 91421-42-0 質(zhì)量規(guī)格:>99%
蘆竹堿 Gramine 87-52-5 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
蘆薈新甙D(標(biāo)準(zhǔn)品) Aloeresin D 105317-67-7 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
蘆薈寧(標(biāo)準(zhǔn)品) Aloenin 38412-46-3 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
蘆薈苷B(標(biāo)準(zhǔn)品) Aloin B 28371-16-6 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
蘆薈苷A Aloin 1415-73-2 質(zhì)量規(guī)格:>85%,BR
蘆薈苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Aloin 1415-73-2 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
蘆薈大黃素(標(biāo)準(zhǔn)品) Aloeemodin 481-72-1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
蘆薈大黃素 Aloeemodin 481-72-1 質(zhì)量規(guī)格:>96%,BR
Denhardt 溶液,50×100mL哪里有賣Diethylmaleate規(guī)格:>98%,BR
Diethyldithiocarbamicacidsilversalt規(guī)格:AR
DiethylAzoxybenzene-4,4'-dicarboxylate規(guī)格:>97.0%(GC)
DiethylAdipate規(guī)格:>99.0%(GC)
DidesmethylZolmitriptan規(guī)格:美國進口
DidesmethylErlotinibHydrochlorideSalt規(guī)格:美國進口
Dideoxyinosine;Didanosine規(guī)格:>98%,BR
Dideoxyadenosine規(guī)格:>98%,BR
DidemethylchloroCitalopramHydrochloride規(guī)格:美國進口
DidemethylMifepristone規(guī)格:美國進口