08-31-00001 高分辨率熔解曲線分析-預(yù)混Mix（PCR）-生化儀器-儀表網(wǎng)

公司介紹主營產(chǎn)品

武漢艾美捷科技有限公司（Amyjet Scientific Inc）是一家具有*的技術(shù)實(shí)力、*的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè)。總部設(shè)在武漢，北京、成都設(shè)有分公司，服務(wù)面向全國。艾美捷科技集進(jìn)口試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司，旨在為生命科學(xué)的發(fā)展提供*的產(chǎn)品與服務(wù)。

艾美捷科技有限公司致力于為廣大的科研機(jī)構(gòu)、高等院校等客戶提供的產(chǎn)品、技術(shù)支持與服務(wù)。公司與國內(nèi)外優(yōu)秀的生物試劑供應(yīng)商保持著密切的合作關(guān)系，目前已成為眾多品牌的中國總代理或一級(jí)代理，可以在*時(shí)間為用戶提供Z前沿的專業(yè)資訊和完備的產(chǎn)品和物流服務(wù)。

專業(yè)的技術(shù)力量使得我們能夠?yàn)閺V大用戶提供強(qiáng)大的技術(shù)支持，深厚的人脈資源使得我們?cè)谌珖饕鞘袚碛斜姸嗟姆种C(jī)構(gòu)和合作伙伴，艾美捷科技有限公司非常榮幸能將世界上*的高科技產(chǎn)品*給國內(nèi)從事生物學(xué)領(lǐng)域科研的老師和同仁。作為專業(yè)性的產(chǎn)品供應(yīng)公司，公司出資存?zhèn)淞舜罅楷F(xiàn)貨，配合優(yōu)秀的銷售隊(duì)伍以及專業(yè)的技術(shù)支持，隨時(shí)為客戶提供服務(wù)。

武漢艾美捷科技有限公司（Amyjet Scientific Inc）是一家具有*的技術(shù)實(shí)力、*的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè)?？偛吭O(shè)在武漢，北京、成都設(shè)有分公司，服務(wù)面向全國。艾美捷科技集進(jìn)口試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司，旨在為生命科學(xué)的發(fā)展提供*的產(chǎn)品與服務(wù)。

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產(chǎn)品簡介在線詢價(jià)

產(chǎn)地	進(jìn)口	加工定制	是

產(chǎn)品名稱：5x HOT FIREPol EvaGreen HRM Mix （NO ROX）
貨號(hào)：08-31-00001

高分辨率熔解曲線分析-預(yù)混Mix（PCR）-生化儀器產(chǎn)品詳情

高分辨率熔解曲線分析（high resolution melting analysis，HRM）是上發(fā)展的一種新型的檢測單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphism，SNP）及掃描突變的新技術(shù)。HRM 無需使用序列特異性探針，而是利用一種飽和染料對(duì) PCR 反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行分析。

HRM技術(shù)因操作簡便快捷、成本低廉、結(jié)果準(zhǔn)確，并且實(shí)現(xiàn)了真正的閉管操作而受到普遍關(guān)注。

HRM原理：

在PCR反應(yīng)前將新型DNA飽和熒光染料加入反應(yīng)體系，然后將PCR產(chǎn)物直接導(dǎo)入高分辨熔解分析儀中，在一定的溫度范圍內(nèi)將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行加熱變性，儀器的光學(xué)檢測系統(tǒng)采集、分析熒光信號(hào)并繪制溫度熔解曲線，根據(jù)不同熔解曲線形狀來區(qū)分（單個(gè)）堿基差異。

較廣泛的 HRM 分析應(yīng)用領(lǐng)域是基因篩查?；蚝Y查是搜索 PCR 擴(kuò)增片段中是否存在未知變異，它可在測序步驟之前進(jìn)行或者作為替代測序方法。由于 PCR 產(chǎn)物突變可導(dǎo)致 DNA 熔解曲線的形狀改變，因此它可以利用 HRM分析檢測。雜交雙鏈 DNA 樣本擴(kuò)增并熔解時(shí)，其熔解曲線不同于純合野生型或突變樣本。如果操作得當(dāng)，可以減少至少95%的測序工作量。隨著DNA染料和分析儀器的發(fā)展，HRM技術(shù)還將繼續(xù)完善和改進(jìn)，在遺傳病分子診斷領(lǐng)域發(fā)揮更多的作用。

HRM應(yīng)用：

• 基因篩查 (突變研究)	• 雜合性研究
• 突變分析	• 物種鑒定
• 單核苷酸多態(tài)性 (SNP) 檢測	• 甲基化分析

作為專注于PCR領(lǐng)域超過24年的高品質(zhì)試劑供應(yīng)商，Solis BioDyne為您*，5X熱啟動(dòng)EvaGreen高分辨率熔解曲線分析-預(yù)混Mix（PCR）：

名稱	貨號(hào)	兼容的PCR儀器
5x HOT FIREPol EvaGreen HRM Mix (NO ROX)	08-31-00001	Bio-Rad: CFX96™ & CFX384™ Qiagen: Rotor-Gene® 6000 Eppendorf: Mastercycler®: ep realplex2 & ep realplex4 Illumina: The Eco™ Roche: LightCycler® 480

* 不含參比染料ROX，如需要含ROX，請(qǐng)選擇：08-33-00001

5X熱啟動(dòng)EvaGreen高分辨率熔解曲線分析-預(yù)混Mix（PCR）提供如下組分：

*的性價(jià)比（進(jìn)口品質(zhì)，國產(chǎn)價(jià)格）：

Solis BioDyne	08-31-00001	1ml（250次）	386	1.54
Thermo	4415452	5*5ml（2500次）	18856	7.54
Qiagen	206546	25ml（2000次）	21810	10.9
DBI	DBI-2232	1000次	11000	11
天根（Tiangen）	FP210-02	500次	2480	4.96
宇恒生物（UE）	S2013	500次	2300	4.6

*的qPCR反應(yīng)體系配置：

5x HOT FIREPol® EvaGreen® HRM Mix	4 µl	1x
正向引物 (10 pmol/µl)	0.16-0.5 µl	80-250 nM
反向引物 (10 pmol/µl)	0.16-0.5 µl	80-250 nM
DNA模板	可變	可變
H2O（PCR級(jí)）	up to 20 µl
Total	20 µl

* DNA模板濃度：cDNA 0.1 pg/μl -10 ng/μl ; gDNA 10 pg/μl – 4 ng/μl

*的qPCR反應(yīng)程序：

起始激活（熱啟動(dòng)）	95ºC	12 min	1
變性	95ºC	15 s	40
退火	60º-65ºC	20 s
延伸	72ºC	20 s

發(fā)表文章實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示：

【1】Negrisolo, Susanna et al. “Could the interaction between LMX1B and PAX2 influence the severity of renal symptoms?” European Journal of Human Genetics 26 (2018): 1708-1712.

使用Solis試劑盒，分析PAX2基因4號(hào)外顯子的錯(cuò)義突變

【2】Gaczkowska, Agnieszka, et al. “Association of CDKAL1 Nucleotide Variants with the Risk of Non-Syndromic Cleft Lip with or without Cleft Palate.” Journal of Human Genetics, vol. 63, no. 4, 2018, pp. 397–406.

使用Solis試劑盒，分析CDKAL1基因SNP

HRM分析成功的關(guān)鍵：

1.保持較短的擴(kuò)增片段，實(shí)現(xiàn)gao的靈敏度。與較大的擴(kuò)增片段相比，100 bp 左右的擴(kuò)增片段可簡化單核苷酸熔解曲線的檢測。

2.確保 PCR 擴(kuò)增片段的特異性。錯(cuò)配產(chǎn)物和引物二聚體可使數(shù)據(jù)解釋復(fù)雜化。引物濃度低于 200nM，MgCl2 在 1.5 mM至3 mM 范圍及使用熱啟動(dòng)DNA 聚合酶將有助于獲得高特異性。

3.確保反應(yīng)使用足夠的模板。一般而言，Ct 應(yīng)低于30，以生成足夠的材料，實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確的熔解分析。

除了上述的高效穩(wěn)健的HRM分析預(yù)混Mix產(chǎn)品，Solis BioDyne為客戶提供終點(diǎn)PCR（end-point PCR），qPCR（real-time PCR），反轉(zhuǎn)錄PCR（Reverse transcription），以及其它PCR所需的配套試劑。產(chǎn)品線縱覽圖如下：

Solis BioDyne來源于歐盟-愛沙尼亞共和國，專注PCR領(lǐng)域超過24年，Solis BioDyne一直致力于開發(fā)和生產(chǎn)高品質(zhì)的生命科學(xué)試劑，現(xiàn)已成為當(dāng)今歐洲*的試劑供應(yīng)商之一。高標(biāo)準(zhǔn)的生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)和服務(wù)使Solis BioDyne成為值得信賴的首xuanPCR供應(yīng)商。我們的DNA聚合酶，PCR Master Mixes，qPCR Mixes和其它試劑被110多個(gè)國家的研究者所使用，包括ding級(jí)研究機(jī)構(gòu)和生物技術(shù)公司。

Solis BioDyne擁有獨(dú)jia的蛋白質(zhì)穩(wěn)定技術(shù)專li，確保其PCR酶與PCR Mixes產(chǎn)品具有*的穩(wěn)定性，研究者可以常溫運(yùn)輸以及常溫下配置PCR反應(yīng)體系（無需冰盒）。即使是室溫放置30天，其酶活性也沒有損耗。

作為Solis BioDyne在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供較全面的Solis BioDyne產(chǎn)品以及訂制服務(wù)。

關(guān)鍵詞：標(biāo)準(zhǔn)

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