商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品分類 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
Bst 4.0 SYBR Green Bead | 恒溫?cái)U(kuò)增系列 | 100Tx25μl | BJ-PJ6568 |
該制品為全體系凍干微球制品,內(nèi)含恒溫?cái)U(kuò)增所用的反應(yīng)緩沖液、SYBR Green 熒光染料、Mg2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶等,使用時(shí)只需要加入引物、模板即可進(jìn)行核酸恒溫?cái)U(kuò)增。Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶具有依賴于 RNA 模板的聚合酶活性(逆轉(zhuǎn)錄),還具有依賴于 DNA 的聚合酶活性,因此無(wú)論 DNA 或 RNA 樣本均可使用該制品進(jìn)行恒溫?cái)U(kuò)增。該制品是進(jìn)行 LAMP 及RT-LAMP 擴(kuò)增反應(yīng)的試劑。
SYBR Green 系列產(chǎn)品為實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)的專用試劑,可直接在恒溫?zé)晒鈨x或定量 PCR 以上進(jìn)行 LAMP 反應(yīng)擴(kuò)增。
儲(chǔ)存:-20℃保存 2 年;室溫(25℃)保存>6 個(gè)月。
使用凍干微球進(jìn)行全擴(kuò)增體系用品的制備方法:將優(yōu)化的擴(kuò)增引物分裝于 0.2 ml EP 管底部,于 70-80℃條件烘干1-2h。烘干后的 0.2 ml EP 管已經(jīng)含有干燥的擴(kuò)增引物,再加入一粒凍干微球即可制備成全擴(kuò)增體系干燥品,該干燥品無(wú)需冷鏈運(yùn)輸,可長(zhǎng)期保存。
反應(yīng)體系說(shuō)明:每一個(gè)凍干微球?yàn)榘凑?25 μl 反應(yīng)體系建立,在使用時(shí)只需要加入 25 μl 的 ddH2O 或模板即可進(jìn)行反應(yīng)。
使用實(shí)例,進(jìn)行 LAMP 熒光擴(kuò)增
1. 配制熒光 LAMP 反應(yīng)體系在 0.2 ml EP 反應(yīng)管中加入下述試劑
Bst 4.0 SG Bead 1 粒
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到液體總量 25 μl
10xLAMP Primer Mix 濃度:FIP/BIP 分別為 16 μM、LoopF/B 分別為 4-8 μM、F3/B3 分別為 2 μM。
2. 反應(yīng)體系配好后,置于熒光定量 PCR 儀中于 65°C進(jìn)行反應(yīng) 15~30min。1min 收集一次熒光信號(hào)。讀取擴(kuò)增曲線進(jìn)行陰性和陽(yáng)性判讀。
3. 根據(jù)熒光擴(kuò)增曲線判讀陽(yáng)性和陰性。
注意事項(xiàng):
(1)關(guān)于礦物油的使用,在配制完 LAMP 反應(yīng)體系后,可加入一滴礦物油覆蓋于反應(yīng)液上部,可以有效的減少氣溶膠的污染。實(shí)驗(yàn)證明礦物油并不影響機(jī)器的熒光數(shù)值讀取。
(2)關(guān)于擴(kuò)增曲線的異常:由于 LAMP 擴(kuò)增速度較快,熒光信號(hào)讀取可能存在矯正計(jì)算問(wèn)題,這與熒光設(shè)備的軟件算法有管。在有些熒光 PCR 儀上,在相對(duì)熒光模式下,表現(xiàn)出曲線飛峰、終點(diǎn)曲線下降的問(wèn)題。此時(shí)調(diào)整到原始熒光值模式下觀察結(jié)果,或致電相應(yīng)設(shè)備供應(yīng)商進(jìn)行咨詢。
下列是公司正在出售的產(chǎn)品:
鋅指蛋白184抗體 英文名;ZNF184 | 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體 英文名;Smad3 |
κ-酪蛋白抗體 英文名;Casein kappa | TGFB1誘導(dǎo)抗凋亡因子1抗體 英文名;TIAF1 |
Complexin II/復(fù)合素2抗體 | 辣根酶標(biāo)記的口蹄疫病毒O型VP1單克隆抗體 |
磷酸化蛋白激酶C(T410)抗體 英文名;phospho-PRKCZ (Thr410) | APC標(biāo)記小鼠CD107a單克隆抗體 |
Complexin I/復(fù)合素1抗體 英文名;CPLX1 | 跨膜蛋白18抗體 英文名;Tmem18 |
微管蛋白聚合促進(jìn)蛋白24 英文名;TPPP | APC標(biāo)記人TNF-α單克隆抗體 英文名;human TNF-α/APC |
RAS癌基因相關(guān)蛋白RAB17抗體 英文名;Rab17 | 死亡相關(guān)蛋白1抗體 英文名;DAP1 |
堿性磷酸酶(組織非特異性)抗體 | PE-Cy5標(biāo)記人CD62E/CD62P單克隆抗體 英文名;human CD62E/CD62P/PE-Cy5 |
9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框50抗體 | 肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白1抗體 |
鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體 英文名;KCTD12 | 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框100抗體 |
9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框43抗體 英文名;C9ORF43 | 環(huán)指蛋白60抗體 英文名;MID2 |
細(xì)絲蛋白2抗體 | 19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框80抗體 英文名;ANGPTL8 |
鋅指蛋白347抗體 | Bst 4.0 SYBR Green Bead磷酸化后期促進(jìn)復(fù)合蛋白3抗體 |