非洲豬瘟病毒PCR檢測試劑盒科研用注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱 | 非洲豬瘟病毒PCR檢測試劑盒科研用 |
規(guī)格 | 50T |
價格 | 來電可享受優(yōu)惠 |
特點優(yōu)勢:
1. 非洲豬瘟病毒PCR檢測試劑盒科研用特異性:
2. 重現(xiàn)性:
3. 靈敏性:
4. 實用性:
性能指標(biāo):
1. 非洲豬瘟病毒PCR檢測試劑盒科研用試劑盒檢測特異性為
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為
3. 靈敏度可達(dá)到103/ml
4. 有效期為6個月
特點:
1. 非洲豬瘟病毒PCR檢測試劑盒科研用站式,足夠 50 次酶切-連接反應(yīng)、50 次預(yù)擴(kuò)反應(yīng)和 1600 次 AFLP PCR(PCR 按 30 uL 體系計算),但不包括 DNA 純化和帶型分析試劑(如 PAGE 電泳試劑和 銀染試劑)。
2. 本系列產(chǎn)品提供 EcoRI-MseI 組合,適用于 GC 含量在 50%以上的基因組。對 GC 含量在 50%以下的基因組,需從本公司采購 AFLP(EcoRI-TaqI)組合。
3. 各種參數(shù)都經(jīng)過優(yōu)化,一次 PCR 所得 AFLP 片段數(shù)一般在 10-100 之間,可重復(fù) 性好,誤差小于 0.6%。4. 本產(chǎn)品適用于基因組在 500 Mb-6000 Mb 的材料(如動物和植物),對于基因組 在 50-500 Mb 的材料(如細(xì)菌和真菌)或 50Mb 以下的材料(如質(zhì)粒,cosmid, BAC,YAC 和 PAC 等),需要分別另購專門的+1 型預(yù)擴(kuò)引物混合液和+3 型 EcoRI 引物(8 種)AFLP 引物對。
技術(shù)概論:
非洲豬瘟病毒PCR檢測試劑盒科研用聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)。它具有特異、敏感、產(chǎn)率高、快速、簡便、重復(fù)性好、易自動化等突出優(yōu)點;能在一個試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數(shù)小時內(nèi)擴(kuò)增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷;可從一根毛發(fā)、一滴血、甚至一個細(xì)胞中擴(kuò)增出足量的DNA供分析研究和檢測鑒定。過去幾天幾星期才能做到的事情,用PCR幾小時便可完成。PCR技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一項革命性創(chuàng)舉和里程碑。
PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
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RanitidineHCl 鹽酸雷尼替丁 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
RanitidineHCl 鹽酸雷尼替丁(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Fluoresceindisodiumsalt 熒光素鈉 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
D-Luciferinsodiumsalt D-蟲熒光素鈉鹽;D-熒光素鈉鹽 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
2',7'-DichlorofluoresceinSodiumSalt 2ˊ,7ˊ-二氯熒光素鈉鹽 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
AzureI 天青I;天青B 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
AzureII 天青II 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
AzureAchloride 天青A 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Triclosan 三氯生 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Resazurin 刃天青/樹脂天青/刃天青鈉 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Celestineblue 天青石藍(lán) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
AzureBeosinate 天青B曙紅 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Limaprost 利馬前列素 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
AzureIIeosinate 天青II曙紅 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
FilipincomplexfromStreptomycesfilipinensis 菲律賓菌素;非律平;Filipin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
非洲豬瘟病毒PCR檢測試劑盒科研用* 人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞cDNA 英文名稱:HPMEC cDNA
* 人肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞cDNA 英文名稱:HPAEC cDNA
* 人肺動脈平滑肌細(xì)胞cDNA 英文名稱:HPASMC cDNA
* 人肺動脈成纖維細(xì)胞cDNA 英文名稱:HPAF cDNA
* 人肺泡上皮細(xì)胞cDNA 英文名稱:HPAEpiC cDNA
* 人支氣管上皮細(xì)胞cDNA 英文名稱:HBEpiC cDNA
* 人氣管上皮細(xì)胞cDNA 英文名稱:HTEpiC cDNA
人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞,RAMOS細(xì)胞
人T淋巴瘤細(xì)胞,H9細(xì)胞 *
人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞,Jurkat,Clone E6-1細(xì)胞 原裝/進(jìn)口
人膀胱癌細(xì)胞,EJ細(xì)胞
人膀胱癌細(xì)胞,HT-1376細(xì)胞 *
人膀胱癌細(xì)胞,RT112細(xì)胞 原裝/進(jìn)口
人膀胱癌細(xì)胞,T24細(xì)胞
小鼠T淋巴細(xì)胞,E.G7-OVA細(xì)胞 *
PCR反應(yīng)五要素:
非洲豬瘟病毒PCR檢測試劑盒科研用參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。