腦膜炎奈瑟菌通用型PCR檢測試劑盒保存注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
產品名稱 | 腦膜炎奈瑟菌通用型PCR檢測試劑盒保存 |
規(guī)格 | 50T |
價格 | 來電可享受優(yōu)惠 |
特點優(yōu)勢:
1. 腦膜炎奈瑟菌通用型PCR檢測試劑盒保存特異性:
2. 重現性:
3. 靈敏性:
4. 實用性:
性能指標:
1. 腦膜炎奈瑟菌通用型PCR檢測試劑盒保存試劑盒檢測特異性為
2. 檢測試劑盒重現性為
3. 靈敏度可達到103/ml
4. 有效期為6個月
特點:
1. 腦膜炎奈瑟菌通用型PCR檢測試劑盒保存一站式,足夠 50 次酶切-連接反應、50 次預擴反應和 1600 次 AFLP PCR(PCR 按 30 uL 體系計算),但不包括 DNA 純化和帶型分析試劑(如 PAGE 電泳試劑和 銀染試劑)。
2. 本系列產品提供 EcoRI-MseI 組合,適用于 GC 含量在 50%以上的基因組。對 GC 含量在 50%以下的基因組,需從本公司采購 AFLP(EcoRI-TaqI)組合。
3. 各種參數都經過優(yōu)化,一次 PCR 所得 AFLP 片段數一般在 10-100 之間,可重復 性好,誤差小于 0.6%。4. 本產品適用于基因組在 500 Mb-6000 Mb 的材料(如動物和植物),對于基因組 在 50-500 Mb 的材料(如細菌和真菌)或 50Mb 以下的材料(如質粒,cosmid, BAC,YAC 和 PAC 等),需要分別另購專門的+1 型預擴引物混合液和+3 型 EcoRI 引物(8 種)AFLP 引物對。
技術概論:
腦膜炎奈瑟菌通用型PCR檢測試劑盒保存聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴增技術。它具有特異、敏感、產率高、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優(yōu)點;能在一個試管內將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數小時內擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷;可從一根毛發(fā)、一滴血、甚至一個細胞中擴增出足量的DNA供分析研究和檢測鑒定。過去幾天幾星期才能做到的事情,用PCR幾小時便可完成。PCR技術是生物醫(yī)學領域中的一項革命性創(chuàng)舉和里程碑。
PCR反應體系與反應條件
標準的PCR反應體系:
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
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CrystalVioletNonahydrate結晶紫九水合物(>95.0%(T))質量規(guī)格:>99%,USP
2-AminoperimidineHydrobromide2-氨基白啶氫溴化物(>98.0%(T))質量規(guī)格:>99%,USP
CPCMonohydrate(=CetylpyridiniumChlorideMonohydrate)CPC一水合物(=西吡氯銨一水合物)(>98.0%(HPLC)(T))質量規(guī)格:>99%,USP
ThymolphthaleinComplexon百里酚酞氨羧絡合劑質量規(guī)格:>99%,USP,Aromataseinhibitor
CalceinBlue鈣黃綠素藍(>98.0%(T))質量規(guī)格:>99%,USP,BR
Glycine-N,N-bis(methylenephosphonicAcid)增甘磷(>97.0%(T))質量規(guī)格:>99%,USP,BR,可用于細胞培養(yǎng)
N-MethyliminodiaceticAcidN-甲基亞氨二乙酸(>98.0%(GC)(T))質量規(guī)格:>99%,USP,BR,可用于細胞培養(yǎng)
NitrilotriaceticAcidDisodiumSalt次氮基三乙酸二鈉鹽(>99.0%(T))質量規(guī)格:>99%,USP,BR,可用于細胞培養(yǎng)
N-(2-Carboxyethyl)iminodiaceticAcidN-(2-羧乙基)亞氨基二乙酸(>98.0%(T))質量規(guī)格:>99%,USP,BR,可用于細胞培養(yǎng)
Triethylenetetramine-N,N,N',N'',N''',N'''-hexaaceticAcid三乙四胺-N,N,N',N'',N''',N'''-六乙酸(>98.0%(T))質量規(guī)格:>99%,USP,可用于細胞培養(yǎng)
TAN[=1-(2-Thiazolylazo)-2-naphthol]TAN[=1-(2-噻唑偶氮)-2-萘酚](>99.0%(T))質量規(guī)格:>99%,USP30
DimethylsulfonazoIII二甲基偶氮磺III質量規(guī)格:>99%,USP30,BR
SulfonazoIII偶氮磺III(>90.0%(HPLC))質量規(guī)格:>99%,USP30,BR,可用于細胞培養(yǎng)
3sodium2-(4-Sulfophenylazo)-1,8-dihydroxynaphthalene-3,6-disulfonateHydrate2-(4-磺基苯偶氮)-1,8-二羥基萘-3,6-二磺酸三鈉鹽水合物(>95.0%(HPLC))質量規(guī)格:>99%,USP31
2,2'-Dihydroxyazobenzene2,2'-二羥基偶氮苯(>98.0%(T))質量規(guī)格:>99%,USP31
腦膜炎奈瑟菌通用型PCR檢測試劑盒保存*兔頸動脈內皮細胞5x10^5cells/T25培養(yǎng)瓶
*兔頸動脈平滑肌細胞5x10^5cells/T25培養(yǎng)瓶
*兔口腔黏膜上皮細胞5x10^5cells/T25培養(yǎng)瓶
*兔淋巴管成纖維細胞5x10^5cells/T25培養(yǎng)瓶
*兔淋巴管內皮細胞5x10^5cells/T25培養(yǎng)瓶
*兔卵巢表面上皮細胞5x10^5cells/T25培養(yǎng)瓶
*兔卵巢間質細胞5x10^5cells/T25培養(yǎng)瓶
人脊髓星形膠質細胞裂解物HA-spL*
小鼠結膜成纖維細胞原代細胞原裝/進口
小鼠結膜上皮細胞原代細胞
小鼠精原細胞原代細胞*
小鼠晶狀體上皮細胞原代細胞原裝/進口
小鼠頸動脈內皮細胞原代細胞
小鼠頸動脈平滑肌細胞原代細胞*
人少突膠質前體細胞-懸浮生長HOPC-os原裝/進口
PCR反應五要素:
腦膜炎奈瑟菌通用型PCR檢測試劑盒保存參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。