細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 | 貨號(hào) |
小鼠心肌細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 原代細(xì)胞 | GOY-01X0947 |
產(chǎn)品介紹:
名稱 小鼠心肌細(xì)胞
2.組織來源:心臟組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介:
小鼠心肌細(xì)胞分離自心臟組織;心臟是脊椎動(dòng)物身體中最重要的一個(gè)器官,主要功能是為血液流動(dòng)提供壓力,把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分。心臟由心肌構(gòu)成,左心房、左心室、右心房、右心室四個(gè)腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,故互不相通,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心臟的作用是推動(dòng)血液流動(dòng),向器官、組織提供充足的血流量,以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì),并帶走代謝的終產(chǎn)物(如二氧化碳、無機(jī)鹽、尿素和尿酸等),使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。心肌細(xì)胞呈菱形、多邊形等不規(guī)則形狀;細(xì)胞培養(yǎng)2h后開始貼壁,呈梭形;到12h左右,細(xì)胞開始伸出偽足,呈菱形、多角形;細(xì)胞分離培養(yǎng)48h以后,大部分伸出偽足、呈巴掌狀,部分心肌細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)搏動(dòng);心肌細(xì)胞為終末分化細(xì)胞,在體外不增殖。體外培養(yǎng)的心肌細(xì)胞可保持結(jié)構(gòu)及功能上的某些特點(diǎn),并具有自發(fā)性節(jié)律搏動(dòng),且心肌細(xì)胞的培養(yǎng)具有簡便、定量、重復(fù)性好以及不受神經(jīng)體液因素的影響等特點(diǎn)。利用培養(yǎng)的心肌細(xì)胞在探索非血液動(dòng)力學(xué)因素所致的心肌肥厚的調(diào)節(jié),研究心肌細(xì)胞的生物力學(xué)、凋亡、受體下調(diào)、缺血預(yù)處理、信號(hào)通路、對作用于心臟的新藥進(jìn)行篩選并對其安全性進(jìn)行評價(jià)以及從培養(yǎng)的心肌細(xì)胞中提取有價(jià)值的生物因子等方面具有廣闊的應(yīng)用前景,對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
5.方法簡介:
()實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠心肌細(xì)胞采用膠原酶-聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,并用化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測:
()實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠心肌細(xì)胞經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
包被條件PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
產(chǎn)品貨號(hào)CM-M073
換液頻率每2-3天換液一次
生長特性貼壁
細(xì)胞形態(tài)梭形、多角形
傳代特性屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液0.25%
培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%
處理方法:
收到細(xì)胞后,檢查外包裝是否完整,細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題,請即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作:
1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。
2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 預(yù)熱培養(yǎng)基(含10%胎牛血清,1%雙抗)。
4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張)。
5. ①若細(xì)胞密度較小,無菌操作,去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上,進(jìn)行傳代。
實(shí)驗(yàn)操作步驟:
a.采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動(dòng)物。
b.立即在無菌超凈臺(tái)內(nèi)用70%乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。
c.用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d.用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無菌的培養(yǎng)皿上。
e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得最佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,
避免開蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗
并*清除殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
2 ug pECFP-Nuc pECFP-Nuc 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Cold-inducible RNA-binding protein
CIN-1添加劑 1ml*5 0.156-10 ng/mL 人激肽釋放2(KLK2)ELISA試劑盒
5g Streptomycin Sulfate 4℃保存 78-5000 pg/mL 轉(zhuǎn)基因植物Bt基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
木糖發(fā)酵管 20支 31.2-2000 pg/
小鼠心肌細(xì)胞C11ORF16 11號(hào)染色體開放閱讀框16抗體 規(guī)格: 0.2ml
ERK1/MAPK3 絲裂原活化蛋白激3抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-MEF2A(Thr319) 磷酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Goat IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗羊IgG 規(guī)格: 0.5mlADRA1/ADRA1B/alpha 1 Adrenergic Receptor alpha 1上素能受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
2 ug pQETirs-system pQETirs-system 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
R2A瓊脂平皿9cm(2-25℃) 10個(gè)/包
25g 十六烷基基 CTAB(Cetyltrimethylammonium Bromide) 室溫干燥保存
250mL Glucose Solution(葡萄糖溶液),20%(W/V) Glucose Solution,20%(W/V) 常溫保存
50次 血液RNAout Blood RNAOUT 4℃保存
1瓶 CCC-HBE-2細(xì)胞株 CCC-HBE-2 低溫運(yùn)輸和保存
Elek氏培養(yǎng)基 Elek Medium 250g
2mL dTTP溶液,2.5mM dTTP Solution -20℃保存
50mL Ammonium Chloride(氯化銨溶液), 0.5M Ammonium Chloride, 0.5M 常溫保存