以下是節(jié)瘤擬桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)的訂購(gòu)信息：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
節(jié)瘤擬桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) | 50T | 電詢 |
需要自備的器材：
1．節(jié)瘤擬桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn)：
1.節(jié)瘤擬桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)即開(kāi)即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡(jiǎn)單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
PCR檢測(cè)試劑盒：
(一)節(jié)瘤擬桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-15min。
(2)移入1.5mlEP管中，4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min，EP管底部可見(jiàn)白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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技術(shù)概論：
節(jié)瘤擬桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發(fā)展起來(lái)的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)。它具有特異、敏感、產(chǎn)率高、快速、簡(jiǎn)便、重復(fù)性好、易自動(dòng)化等突出優(yōu)點(diǎn)；能在一個(gè)試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數(shù)小時(shí)內(nèi)擴(kuò)增至十萬(wàn)乃至百萬(wàn)倍,使肉眼能直接觀察和判斷；可從一根毛發(fā)、一滴血、甚至一個(gè)細(xì)胞中擴(kuò)增出足量的DNA供分析研究和檢測(cè)鑒定。過(guò)去幾天幾星期才能做到的事情，用PCR幾小時(shí)便可完成。PCR技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一項(xiàng)革命性創(chuàng)舉和里程碑。
PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系：
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10～100pmol
模板DNA 0.1～2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
PCR反應(yīng)五要素： 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物： 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3’端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)，被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)，這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
α2-微球蛋白樣蛋白1(α2ML1)elisa英文名稱：α2ML1 ELISA Kit，英文縮寫(xiě)：α2ML1，產(chǎn)品別名：α2-微球蛋白樣蛋白1(α2ML1)ELISA，α2-微球蛋白樣蛋白1(α2ML1)產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
Tescalcin蛋白(TSC)elisa英文名稱：TSC ELISA Kit，英文縮寫(xiě)：TSC，產(chǎn)品別名：Tescalcin蛋白(TSC)ELISA，Tescalcin蛋白(TSC)產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)elisa英文名稱：VCC1 ELISA Kit，英文縮寫(xiě)：VCC1，產(chǎn)品別名：VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)ELISA，VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
Smad同源物1(Smad1)elisa英文名稱：Smad1 ELISA Kit，英文縮寫(xiě)：Smad1，產(chǎn)品別名：Smad同源物1(Smad1)ELISA，Smad同源物1(Smad1)產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
R-脊椎蛋白3(RSPO3)elisa英文名稱：RSPO3 ELISA Kit，英文縮寫(xiě)：RSPO3，產(chǎn)品別名：R-脊椎蛋白3(RSPO3)ELISA，R-脊椎蛋白3(RSPO3)產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
PTB結(jié)合核蛋白2(RAVER2)elisa英文名稱：RAVER2 ELISA Kit，英文縮寫(xiě)：RAVER2，產(chǎn)品別名：PTB結(jié)合核蛋白2(RAVER2)ELISA，PTB結(jié)合核蛋白2(RAVER2)產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
N-酰轉(zhuǎn)移酶5(NAT5)elisa英文名稱：NAT5 ELISA Kit，英文縮寫(xiě)：NAT5，產(chǎn)品別名：N-酰轉(zhuǎn)移酶5(NAT5)ELISA，N-酰轉(zhuǎn)移酶5(NAT5)產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
Nischarin蛋白(NISCH)elisa英文名稱：NISCH ELISA Kit，英文縮寫(xiě)：NISCH，產(chǎn)品別名：Nischarin蛋白(NISCH)ELISA，Nischarin蛋白(NISCH)產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
Misato同源物1(MSTO1)elisa英文名稱：MSTO1 ELISA Kit，英文縮寫(xiě)：MSTO1，產(chǎn)品別名：Misato同源物1(MSTO1)ELISA，Misato同源物1(MSTO1)產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
Kintoun蛋白(KTU)elisa英文名稱：KTU ELISA Kit，英文縮寫(xiě)：KTU，產(chǎn)品別名：Kintoun蛋白(KTU)ELISA，Kintoun蛋白(KTU)產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
G抗原10(GAGE10)elisa英文名稱：GAGE10 ELISA Kit，英文縮寫(xiě)：GAGE10，產(chǎn)品別名：G抗原10(GAGE10)ELISA，G抗原10(GAGE10)產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
Midline 1蛋白(MID1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 現(xiàn)貨供應(yīng)
Midline 2蛋白(MID2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 現(xiàn)貨供應(yīng)
Misato同源物1(MSTO1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 現(xiàn)貨供應(yīng)
Misato同源物1(MSTO1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 現(xiàn)貨供應(yīng)
MRG結(jié)合蛋白(MRGBP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 現(xiàn)貨供應(yīng)
Muskelin 1蛋白(MKLN1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 現(xiàn)貨供應(yīng)
節(jié)瘤擬桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)*人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞，CCRF-CEM細(xì)胞英文名稱：
*人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞，CEM/C1細(xì)胞英文名稱：
*人狀腺癌狀細(xì)胞，Bcpap細(xì)胞英文名稱：
*人狀腺癌細(xì)胞，F(xiàn)TC-133細(xì)胞英文名稱：
*人狀腺癌細(xì)胞，K1細(xì)胞英文名稱：
*人狀腺癌細(xì)胞，SW579細(xì)胞英文名稱：
*人狀腺癌細(xì)胞，TT細(xì)胞英文名稱：
人狀腺癌細(xì)胞，K1細(xì)胞*
人狀腺癌細(xì)胞，SW579細(xì)胞原裝/進(jìn)口
人狀腺癌細(xì)胞，TT細(xì)胞
人肺成纖維細(xì)胞，HPF細(xì)胞原代細(xì)胞*
人肝Kuffer細(xì)胞原代細(xì)胞原裝/進(jìn)口
人肝癌原代細(xì)胞原代細(xì)胞
人肝單核細(xì)胞，HLMC細(xì)胞原代細(xì)胞*
人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞，HHSECP細(xì)胞原代細(xì)胞原裝/進(jìn)口
