商品介紹
測(cè)定意義 甜菜堿是一種廣泛分布于動(dòng)植物及微生物體內(nèi)的季銨型水溶性生物堿,是生物體內(nèi)的氧化產(chǎn)物,可以增強(qiáng)免疫力、降血脂、抗氧化、抗腫瘤,并可作為甲基供體,參與促進(jìn)動(dòng)物蛋白質(zhì)和脂肪代謝、增進(jìn)食欲、緩和應(yīng)激、調(diào)節(jié)滲透壓、穩(wěn)定維生素等多種生物作用,在化工、醫(yī)藥、食品添加劑等領(lǐng)域有較廣泛的應(yīng)用。 測(cè)定原理 甜菜堿在強(qiáng)酸條件下和雷氏鹽發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生沉淀,沉淀用丙酮溶解形成紅色溶液,在525nm處有特征吸收峰,測(cè)定525nm處的吸光值,可得樣品的甜菜堿含量。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、甲醇、、鹽酸和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說(shuō)明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6933 |
所需的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長(zhǎng)到 40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
四丁基氯化銨 離子色譜級(jí), ≥99.0%2-啉 98%Anti-MYOG/Myogenin 肌紅蛋白抗體(肌生成素)
四丁基氯化銨 97%8-羥基喹啉 AR,99.0%Anti-Nephrin 去氧素抗體
四乙基氫氧化銨 AR,25%水溶液8-羥基喹啉-5-磺酸 水合物 98%Anti-nectin 2/CD112 黏附分子CD112抗體
四乙基氫氧化銨 AR,25%甲溶液8-羥基喹啉銅 94%Anti-Nestin 巢蛋白/神經(jīng)上皮干蛋白抗體
三鹽酸鹽 98%5-硝基-2-酚 98%Anti-Nestin 巢蛋白/神經(jīng)上皮干蛋白抗體(大、小鼠)
四丁基氫氧化銨溶液 ~25% in H2O (~0.8 M)8-羥基喹啉半鹽 98%Anti-Neurobeachin 蛋白激錨定蛋白抗體
四丁基氫氧化銨溶液 10% in H2O1,2-環(huán)己二 99%Anti-AKAP95 蛋白激A錨定蛋白95抗體
四丁基氫氧化銨溶液 ~25% in methanol (~0.8 M)4-溴苯乙 99%Anti-NeuN 神經(jīng)元核抗原抗體
甜菜堿含量微量法檢測(cè)試劑盒小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
豬胰島素(INS)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
小鼠骨粘連蛋白(ON)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
雞孕激素/孕酮(PROG)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
猴環(huán)腺苷(cAMP)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體(IGF-1R)免疫試劑盒*直銷
兔子胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
小鼠前列腺素E2(PGE2)免疫試劑盒*直銷
豬早老素1(PS-1)免疫試劑盒*直銷