細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 | 貨號 |
肝癌細(xì)胞:HB611 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細(xì)胞系 | GOY-01X0343 |
產(chǎn)品介紹:
名稱 肝癌細(xì)胞:HB611
別稱HB 611
年齡(性別)1歲
組織來源肝;肝癌
生長特性貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣
背景描述HB611細(xì)胞是一株向人肝癌細(xì)胞系Huh6中轉(zhuǎn)入乙肝病毒HBV的基因組而建立的細(xì)胞系,可產(chǎn)生大量的乙肝病毒表面抗原HBsAg。
生長培養(yǎng)基DMEM+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例1:2-1:4
推薦換液頻率2~3次/周
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
處理方法:
收到細(xì)胞后,檢查外包裝是否完整,細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題,請即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作:
1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。
2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 預(yù)熱培養(yǎng)基(含10%胎牛血清,1%雙抗)。
4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張)。
5. ①若細(xì)胞密度較小,無菌操作,去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上,進(jìn)行傳代。
實(shí)驗(yàn)操作步驟:
a.采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動物。
b.立即在無菌超凈臺內(nèi)用70%乙醇擦洗整個(gè)動物。
c.用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d.用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無菌的培養(yǎng)皿上。
e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得最佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,
避免開蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗
并*清除殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
小鼠 CHL-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
甲型流感 H3N2 (A/Victoria/210/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 RAB27B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 PPT1 / Palmitoyl-protein thioesterase 1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 FAM171B / KIAA1946 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 CART / CARTPT 人細(xì)胞裂解液 (ows\system32\EhStorShell.dll
肝癌細(xì)胞:HB611 Rabbit Anti-chicken IgG/AP 堿性磷酸(AP)標(biāo)記的兔抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml
BCAR1 抗雌激素耐藥蛋白1 規(guī)格: 0.2mlGYG1 糖原蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
細(xì)菌保存培養(yǎng)基 Bacterial Storage Medium 250g
5000U SP6 RNA聚合 SP6 RNA Polymerase -20℃保存
250mL RIPA Buffer without SDS RIPA Buffer without SDS 常溫保存
亞硫酸鐵素B瓊脂 Sulfite Iron Agar 250g
250g 聚乙二醇 6000 PEG6000 室溫陰涼干燥保存
亞碲酸鹽肉湯培養(yǎng)基基礎(chǔ) Sodium Tellurite Broth Base 250g
50次 微量樣品盒 Tiny Sample DNA-RNAOUT 4℃保存
100mL Bicine Buffer,0.5M,pH7.4 Bicine Buffer,0.5M,pH7.4 常溫保存
1000U 核酸內(nèi)切 IV Endonuclease IV -20℃保存
CK42 細(xì)胞角蛋白42 規(guī)格: 0.1ml