操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費(fèi)代測。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠維生素D3(VD3)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Rat vitamin D3 (VD3) ELISA Kit |
貨號 | YS-R12327 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.1g
草酯;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 122008-85-9 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.1g
多效唑;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 76738-62-0 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.1g
環(huán)唑;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 106325-08-0 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.1g
乙磷;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.1g
甲;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 34388-29-9 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.1g
烯啶胺;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 150824-47-8 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.1g
除脲;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 35367-38-5 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.25g
胺-對照品;有報告 461-58-5 訂購|咨詢 規(guī)格: 100mg
低聚果糖-蔗果四糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證 13133-07-8 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
叔丁基對羥基苯甲(含2-和3-異構(gòu)體) 25013-16-5 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.25g
蘆薈甙B 28371-16-6 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
牡丹皮苷C 172760-03-1 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
槲皮素7-O-α-L鼠李糖苷 22007-72-3 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
異桑葉生物堿 169105-89-9 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
大鼠維生素D3(VD3)ELISA檢測試劑盒Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人小細(xì)胞肺細(xì)胞英文名稱:NCI-H446
小鼠白血病細(xì)胞英文名稱:P388
浸液湯培養(yǎng)基/浸液湯/Meat Infusion Broth溶血性鏈球菌、蠟樣芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌的增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
假單胞P瓊脂/Pseudomonas Agar P銅綠(綠膿)假單胞菌色素生成試驗250克國產(chǎn)/進(jìn)口
PLET瓊脂基礎(chǔ)/多粘菌素B溶菌酶乙二胺四乙酸乙酸亞瓊脂基礎(chǔ)/PLET Agar Base炭疽桿菌的分離鑒別250克國產(chǎn)/進(jìn)口
人肺泡上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
小鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 用途: 用于普通的或營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng),還用于醫(yī)藥工業(yè)潔凈室無菌程度的監(jiān)測及消毒劑消毒效果的...
蛋白胨水 (靛基質(zhì)培養(yǎng)基) 規(guī)格: 100g 用途: 供鑒別細(xì)菌能否產(chǎn)生靛基質(zhì)的生化反應(yīng)
半糖凝集素9(GAL9)重組蛋白英文名稱:Recombinant Galectin 9 (GAL9)
滑行蛋白α(TXLNα)重組蛋白英文名稱:Recombinant Taxilin Alpha (TXLNa)
熱休克蛋白47(HSP47)重組蛋白英文名稱:Recombinant Heat Shock Protein 47 (HSP47)
野鼠色基因相關(guān)蛋白(AGRP)重組蛋白英文名稱:Recombinant Agouti Related Protein (AGRP)
HCT 116(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2