注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 編號(hào) |
雙埃柯病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書 | Parechovirus(PeV) PCR | YS-R3841 |
使用及效果:
CR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
雙??虏《綪CR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中Z小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
英文名稱:Human orphanin FQ/nociceptin,OFQ/N ELISA Kit人孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒進(jìn)口/分裝規(guī)格:96T/48T常溫,避光含量測(cè)定*:*:斑蟊素規(guī)格:20mg
英文名稱:Human Stromelysin-1,ST1 ELISA Kit人基質(zhì)裂解素(ST1)ELISA試劑盒 進(jìn)口/原裝規(guī)格:96T/48T常溫,避光鑒別*:*:槐定堿規(guī)格:20mg
英文名稱:Human Stromelysin-2,ST2 ELISA Kit人基質(zhì)裂解素(ST2)ELISA試劑盒 *規(guī)格:96T/48T常溫,避光含量測(cè)定*:*:桉油精規(guī)格:0.1ml
英文名稱:Human Stromelysin-3,ST3 ELISA Kit人基質(zhì)裂解素(ST3)ELISA試劑盒 *規(guī)格:96T/48T常溫,避光鑒別*:*:檀香油規(guī)格:0.1ml
英文名稱:Human Lipoxin A4,LXA4 ELISA Kit人氧素A4(LXA4)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝規(guī)格:96T/48T常溫,避光含量測(cè)定*:*:4-氧基規(guī)格:20mg
英文名稱:Human proteinase-antineutrophil cytoplasmic antibody,PR3-ANCA ELISA Kit人蛋白酶3特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)ELISA試劑盒進(jìn)口/原裝規(guī)格:96T/48T常溫,避光內(nèi)標(biāo)無(wú)含測(cè)*:*:對(duì)二氨基醛規(guī)格:100mg
規(guī)格:20mg常溫,避光供含量測(cè)定用*:偽原薯蕷皂苷(暫行)人15加氧酶(15-LO/LOX)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/分裝
規(guī)格:20mg常溫,避光供含量測(cè)定用*:絡(luò)石苷小鼠15加氧酶(15-LO/LOX)ELISA Kit,48T/96T *
規(guī)格:0.1ml2-8℃,避光鑒別*:α-松油醇(暫行)大鼠15加氧酶(15-LO/LOX)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
規(guī)格:20mg常溫,避光供含量測(cè)定用*:竹節(jié)參皂苷ⅠVa(暫行)人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/原裝
規(guī)格:20mg常溫,避光供含量測(cè)定用*:三百草酮小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/分裝
規(guī)格:20mg常溫,避光鑒別*:櫟癭酸大鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA Kit,48T/96T *
規(guī)格:20mg4℃,避光含量測(cè)定*:大戟二烯醇兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。