1 適用范圍:
可用于各類食品和原料中沙門氏菌的定性和初篩檢測。以及突發(fā)事件應(yīng)急檢測需要。
2 方法原理:
將選擇性培養(yǎng)基中加入專一性的辛酯酶顯色劑,并將其加載在紙片上,通過培養(yǎng),如果樣品中含有沙門氏菌,即可在紙片上呈紫紅色的菌落。
3 操作方法
(1)樣品處理:無菌稱取待測樣品25g(或25mL)放入含有225mL無菌生理鹽水的采樣瓶或均質(zhì)杯內(nèi),經(jīng)充分振搖或置均質(zhì)器中做成1:10的樣品勻液。
(2)接種:將測試片置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置5 min使培養(yǎng)基凝固,非常后用手輕輕地壓一下。每個樣品接種兩片。
(3)培養(yǎng):將測試片疊在一起放回原自封袋中,堆疊片數(shù)不超過12片,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。
(4)結(jié)果觀察:對測試片進行觀察,呈紫紅色的菌落為沙門氏菌;呈藍色的菌落為其他大腸菌,葡萄球菌不生長。
4 附加說明
(1)有關(guān)驗證試驗表明,測試片具有較強的敏感性,在1.5×10-8稀釋時仍可檢出菌落。臨床實際應(yīng)用結(jié)果顯示陽性檢出率高于分離培養(yǎng)法1.84‰,復(fù)查準確率提高約13.0%(中國衛(wèi)生檢驗雜志2006, 16(8):954-955)。
(2)本法還可應(yīng)用于從業(yè)人員體檢、中樣品和物體表面的檢測,用取樣棉簽涂抹被測物體表面,放入裝有3mL滅菌生理鹽水的試管中,搖晃10s,然后取1mL接種到測試片上。
(3)注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。