NanoDrop2000微量分光光度計(jì)
使用高能量氙燈(pulsed xenon flash lamp)可提供190~840nm的全光譜檢測,且不需要暖機(jī),開機(jī)后立即使用。搭配高感度CCD array檢測器,檢測吸收值可高達(dá)300Abs(dsDNA濃度2~15000ng/ul),大部分純化后的核酸幾乎都不需要稀釋即可檢測。
待測樣品的均質(zhì)性是NanoDrop2000微量分光光度計(jì)的高要求,一般核酸、蛋白質(zhì)樣品能在檢測前以vortex mixer震勻?yàn)楹茫魺ovortex mixer也應(yīng)以pipette吸放數(shù)次混勻。若擔(dān)心genomic DNA可能因前述動作而斷裂,則改以55?C加熱約一分鐘,使樣品在偵測前呈現(xiàn)均勻狀態(tài),以確保 2ul 具有代表性。
檢測時(shí)選擇不同檢測模式,可以得到快速的結(jié)果:
● Nucleic Acid – 吸收光譜、230nm, 260nm, 280nm吸收值(換算成10mm光徑吸收值)、260/280 ratio、260/230 ratio及核酸濃度。
● UV-Vis – 190~840nm間所有波長的吸收值及光譜(以1mm光徑吸收值呈現(xiàn))。
● A280蛋白質(zhì)定量法 – 280nm吸收值(換算成10mm光徑吸收值)、260/280 ratio及蛋白質(zhì)濃度。僅適用于純化后的蛋白質(zhì),須具有已知的質(zhì)量消光系數(shù)(mass extinction coefficient)方可計(jì)算。
● BCA、Bradford及Lowry – 依不同呈色劑提供不同波長吸收值結(jié)果,自動畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算R square,待測蛋白質(zhì)濃度。
* 蛋白質(zhì)檢測模式目前提供BCA、Bradford及Lowry三種常見定量呈色劑,因呈色劑隨時(shí)間會逐漸加深,使用前請?jiān)旈喸噭┱f明書并制備不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,在好時(shí)間內(nèi)完成檢測,以得到良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線多可有七個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品,每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品多可做五重復(fù)。
* 測蛋白質(zhì)時(shí)樣品體積需使用 2ul,每個(gè)樣品檢測后需以Kimwipes 低塵擦拭紙(編號: 34155 )擦拭15~20回,以避免呈色劑與蛋白質(zhì)的殘留。
NanoDrop2000微量分光光度產(chǎn)品描述:
NanoDrop ND-2000C為NanoDrop ND-2000的升級版本,ND-2000C具有ND-2000全部功能,除此之外,它還有以下突出特點(diǎn):
1、檢測耗時(shí)更短,僅需3秒鐘;
2、具比色杯或者檢測孔兩種選擇,適合檢測各種類型的樣本,包括易揮發(fā)性物質(zhì)的檢測;
3、檢測范圍更加寬泛,檢測下限可低至0.4 ng/μl (dsDNA);
4、內(nèi)置比色杯,可進(jìn)行實(shí)時(shí)動力學(xué)曲線研究,或者OD600細(xì)胞濃度的測量。
ND-2000C技術(shù)參數(shù):
檢測孔測量時(shí):
1、波長范圍: 190-840nm;
2、波長精度: 1nm;
3、分辨率: <1.8 nm (FWHM at Hg 253.7 nm);
4、其它: 1mm光程長度(可自動調(diào)整到0.05mm);
5、檢測下限:2ng/μl(dsDNA);
6、檢測上限:15000ng/μl(dsDNA);
7、吸光率精確度:0.002 absorbance (1mm光程);
8、吸光率準(zhǔn)確性:2%(at 0.76 at 257 nm);
9、吸光率范圍:0.02-300 (相當(dāng)于10mm光程);
10、核酸檢測周期:< 5s;
11、體積:14cm×20cm。