參數規(guī)格：
產品名稱：甲型流感病毒熒光PCR法檢測試劑盒
產品分類：熒光PCR法
貨號：CP99100
產品規(guī)格：50次
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年
產品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
山羊血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA Kit Goat angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit
山羊血管緊張素Ⅰ(ANG-Ⅰ)ELISA Kit Goat angiotension Ⅰ,ANG-Ⅰ ELISA Kit
山羊褪黑素(MT)ELISA Kit Goat Melatonin,MT ELISA Kit
山羊銅藍蛋白(CP)ELISA Kit Goat Ceruloplasmin,CP ELISA Kit
山羊瘦素(LEP)ELISA Kit Goat Leptin,LEP ELISA kit
山羊生長激素(GH)ELISA Kit Goat growth hormone,GH ELISA KIT
山羊腺原氨酸(T3)ELISA Kit Goat Tri-iodothyronine，T3 ELISA Kit
山羊熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA Kit Goat Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA KIT
山羊醛固酮(ALD)ELISA Kit Goat aldosterone,ALD ELISA Kit
山羊前列腺素內過氧化物合酶1(前列腺素G/H合酶和環(huán)氧合酶)(PTGS1)ELISA Kit Goat PTGS1 ELISA kit
山羊前列腺素G/H合酶2(PTGS2)ELISA Kit Goat Prostaglandin G/H synthase 2,PTGS2 ELISA kit
山羊前列腺素E2(PGE2)ELISA Kit Goat prostaglandin E2,PGE2 ELISA kit
山羊皮質醇(Cortisol)ELISA Kit Goat Cortisol ELISA Kit
山羊腦啡肽(ENK)ELISA Kit Goat enkephalin,ENK ELISA Kit
山羊免疫球蛋白M(IgM)ELISA Kit Goat Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit
山羊免疫球蛋白G(IgG)ELISA Kit Goat Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit
山羊免疫球蛋白A(IgA)ELISA Kit Goat Immunoglobulin A,IgA ELISA Kit
甲型流感病毒熒光PCR法檢測試劑盒山羊粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA Kit Goat Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF ELISA Kit
山羊口蹄疫抗體(FMDV IgM)ELISA Kit Goat antibody against Foot and Mouth Disease(FMDV)IgM ELISA Kit
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復，則標記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標準曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復，則標記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。
