大豆異黃酮是大豆生長(zhǎng)中形成的一種次級(jí)代謝產(chǎn)物。由于是從植物中提取,與雌激素有相似結(jié)構(gòu),當(dāng)大豆異黃酮的雌激素作用影響到激素分泌、代謝生物學(xué)活性、蛋白質(zhì)合成、生長(zhǎng)因子活性,是天然的癌癥化學(xué)預(yù)防劑。平時(shí)多食用富含大豆異黃酮的食物有助于抑制前列腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng),膳食中的大豆異黃酮主要來(lái)自大豆和大豆制品。采用魯創(chuàng)有效液相色譜儀分析測(cè)定豆制品中大豆異黃酮含量,建立了大豆異黃酮的有效液相色譜分析方法。
樣品制備:
稱取10g大豆樣品,用10倍量80%乙醇加熱回流1h后,使用超聲提取30min,將上清液用定性濾紙過(guò)濾,濾液移至100ml容量瓶中,用0.32μm濾膜的溶劑過(guò)濾器進(jìn)行過(guò)濾;準(zhǔn)確吸取液體樣品10ml與離心管中,采用多功能氮吹儀在50℃溫度下濃縮、結(jié)晶;用5ml乙腈-0.2%乙酸溶液溶解,0.32μm濾膜過(guò)濾后移入進(jìn)樣瓶中供液相色譜儀分析。
檢測(cè)儀器:
魯創(chuàng)有效液相色譜儀LC-3000(配置紫外檢測(cè)器,手動(dòng)進(jìn)樣器)、多功能氮吹儀NC-2012
試劑:甲醇、乙腈(色譜純);水:重蒸水;樣品制備用酒精為分析純;異黃酮標(biāo)準(zhǔn)品大豆甙、黃豆甙、染料木甙、大豆甙元、黃豆甙元、染料木素。
色譜條件:
色譜柱:C18(150mm*6mm,5μm),流動(dòng)相為乙腈溶液和乙酸溶液,流速為0.15ml/min,柱溫:200℃,進(jìn)樣量5μL。
使用溶劑過(guò)濾器處理制備樣品,保證了樣品純度,有效防止樣品中雜質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響;水浴氮吹儀對(duì)樣品溶劑進(jìn)行隔絕空氣,高溫加熱結(jié)晶處理,更適于標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液的配置。液相色譜儀檢測(cè)豆制品中異黃酮的方法重現(xiàn)性好,精密度高,回收率高。