一、產(chǎn)品概要
是一類真菌(如黃曲霉和寄生曲霉)的有毒的代謝產(chǎn)物,它們具有很強(qiáng)的致癌性,主要存在于谷物、堅(jiān)果、棉籽以及一些和人類血液,動(dòng)物飼料相關(guān)的產(chǎn)品中。其中B1(AFB1)的毒性、致癌性、污染頻率均居于。薄層色譜一直是檢測(cè)常用的方法,但是此方法制備樣品及分析樣品時(shí)費(fèi)時(shí)又費(fèi)力。而使用B1 ELISA試劑盒則能夠快速而準(zhǔn)確的分析樣品中B1殘留。
本試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)的新一代真菌毒素檢測(cè)產(chǎn)品,操作時(shí)間短于60min,能限度地減少操作誤差和工作強(qiáng)度。
二、試驗(yàn)原理
本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,在酶標(biāo)板微孔條上預(yù)包被B1抗原,樣本中B1和此抗原競(jìng)爭(zhēng)抗B1抗體(抗試劑),同時(shí)抗B1抗體與酶標(biāo)二抗(酶標(biāo)物)相結(jié)合,經(jīng)TMB底物顯色,樣本吸光值與其含有的B1成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可得出樣品中B1的含量。
三、適用范圍
可定性、定量檢測(cè)米粉及牛奶中的B1。
四、包裝組成
酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品×5瓶、AFB1酶標(biāo)物、AFB1抗試劑、底物液A液、底物液B液、終止液、濃縮洗滌液、濃縮樣品稀釋液
五、樣本處理
1、米粉樣本處理方法
粉碎并取有代表性的樣本置入聚苯乙烯離心管中,加入甲醇與其混合;劇烈振蕩(或渦旋);離心;取上清,再加入樣品稀釋液;振蕩或手搖勻, 取液進(jìn)行分析。
樣品稀釋倍數(shù):12倍
2、牛奶樣本處理方法
取待檢測(cè)的牛奶樣本置入聚苯乙烯離心管中,加入甲醇-水溶液與其混合;取液進(jìn)行分析。
六、操作步驟
1、將所需試劑回溫;
2、取需要數(shù)量的微孔板;
3、洗滌工作液在使用前也需回溫;
4、將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào);
5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本;
6、洗板;
7、加酶標(biāo)物
8、顯色;
9、測(cè)定。
七、結(jié)果判定
粗略判定:用樣本的平均吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)值比較即可得出其濃度范圍;
定量判定:定量分析
八、檢測(cè)方法靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度
試劑盒靈敏度:10ng/kg
檢測(cè)限:
米粉……………………………………………………120ng/kg
牛奶……………………………………………………50ng/kg
回收率:
米粉、牛奶……………………………………………90±15%
精密度:試劑盒的變異系數(shù)均小于10%
九、貯藏條件及保存期
貯藏條件:保存試劑盒于2~8℃;
保存期:該產(chǎn)品有效期為12個(gè)月。