GTPase Cdc42抑制劑(IN)正在熱銷的產(chǎn)品：ALR/FITC 熒光標(biāo)記肝再生增強(qiáng)因子抗體IgG化鍶，六水 99.99% metals basis
ALT1/GPT 1/FITC 熒光標(biāo)記谷氨氨轉(zhuǎn)移1抗體IgG結(jié)晶硫鈉,十水 AR，≥99.0%
AMACR/P504S /FITC 熒光標(biāo)記α－酰消旋抗體IgG結(jié)晶硫鈉,十水 CP，≥97.0%
HADHSC (human)/FI
中文名稱：GTPase Cdc42抑制劑(IN)
英文名稱：IN
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
貨號(hào)：FS-X11081
產(chǎn)品介紹:
IN是一個(gè)選擇性的GTPase Cdc42抑制劑，IC50值是2uM。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號(hào)：425399-05-9 純度：98.64% 分子量：306.4 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β4抗體TGF β4 Lefty
磷suan化微管相關(guān)蛋白抗體 phospho-Tau protein(Ser202)
轉(zhuǎn)錄因子12抗體 TCF12
跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白21抗體 TMP21
睪特異蛋白抗體 TSBP
THAP2蛋白抗體 THAP2
瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白5抗體（M亞家族） TRPM5
瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白4抗體（M亞家族） TRPM4
轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 Transportin 1
核凋亡因子THAP1抗體 THAP1
精形成相關(guān)凋亡蛋白2抗體 TSARG2
細(xì)胞毒顆粒相關(guān)蛋白TIA-1抗體 TIA1
GTPase Cdc42抑制劑(IN)嗜麥芽寡養(yǎng)單胞 3-Acetoxy-4-cadinen-8-one
黃硬皮馬勃 3-Acetoxy-24-hydroxydammara-20,2
靈芝 30-Hydroxylup-20(29)-en-3-one
擬威克酵母屬 3,4-Dihydro-3,4-dihydroxynaphtha
謝瓦曲霉 3',4',7-Trimethoxyflavan
尖孢鐮孢 3,22-Dihydroxyolean-12-en-29-oic
傳染性喉氣管炎病 3-(4-Hydroxy-3-methoxyphenyl)pro
大腸埃希 2β-Hydroxykolavelool
PET28a-EGFP 熒光蛋白大腸桿（綠色） 2'-O-Methylbroussonin C
無(wú) 2-Epitormentic acid
*蛹蟲草 29-Norcycloart-23-ene-3,25-diol
綠色木霉 28-Hydroxy-3-oxoolean-12-en-29-o
赭曲霉 25-Hydroxycycloart-23-en-3-one
清酒假絲酵母 22-Dehydroclerosteryl acetate
枯草芽孢桿 21αH-24-Norhopa-4(23),22(29)-die
