本產(chǎn)品線性范圍寬，96孔板中，在12個(gè)至10萬個(gè)細(xì)胞范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。不同細(xì)胞的檢測(cè)數(shù)量上限會(huì)有顯著不同。如果檢測(cè)的細(xì)胞數(shù)量不超過3萬，也可使用性價(jià)比更高但線性范圍略窄的CellTiter-Lumi™發(fā)光法細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒(C0065)。
本產(chǎn)品的性能達(dá)到甚至在有些方面優(yōu)于國(guó)外同類產(chǎn)品。本產(chǎn)品的性能和用途與Promega公司的CellTiter-Glo ^® Luminescent Cell Viability Assay(簡(jiǎn)稱CellTiter-Glo^®或CTG)和CellTiter-Glo ^® 2.0 Assay(簡(jiǎn)稱CellTiter-Glo ^®2.0或CTG2.0)基本相同，本產(chǎn)品的檢測(cè)效果及與國(guó)外同類產(chǎn)品Competitor P及Competitor P2.0的檢測(cè)效果比較參見圖1，在發(fā)光強(qiáng)度和對(duì)于某些細(xì)胞的線性范圍有顯著的優(yōu)勢(shì)。
本產(chǎn)品發(fā)光強(qiáng)度高。對(duì)于相同的細(xì)胞樣品，本產(chǎn)品的發(fā)光效果比國(guó)外同類產(chǎn)品Competitor P或Competitor P2.0強(qiáng)約40-99%，實(shí)測(cè)效果的差異會(huì)因細(xì)胞種類的不同有所不同，例如對(duì)于NIH3T3和HeLa細(xì)胞的檢測(cè)，CTL Plus的發(fā)光效果比國(guó)外同類產(chǎn)品Competitor P或Competitor P2.0強(qiáng)約60-99%；而對(duì)于Jurkat細(xì)胞的檢測(cè)，CTL Plus的發(fā)光效果則比國(guó)外同類產(chǎn)品Competitor P或Competitor P2.0強(qiáng)約40-50% (圖1D)。
本產(chǎn)品檢測(cè)靈敏度高，線性范圍寬，可以在12個(gè)至10萬個(gè)細(xì)胞范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。使用本產(chǎn)品檢測(cè)細(xì)胞數(shù)量?jī)H為25個(gè)/孔時(shí)，發(fā)光強(qiáng)度可達(dá)空白孔的2倍左右。對(duì)于某些細(xì)胞，例如HeLa細(xì)胞等，CTL Plus有非常的線性范圍，標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率在12-400個(gè)細(xì)胞和在12-100,000個(gè)細(xì)胞范圍內(nèi)基本相同(圖1A、1B，斜率分別為43.434和43.890)，但國(guó)外同類產(chǎn)品Competitor P標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率在12-400個(gè)細(xì)胞和在12-100,000個(gè)細(xì)胞范圍內(nèi)發(fā)生了非常顯著變化(圖1A、1B，斜率分別為29.493和20.765)。本產(chǎn)品與國(guó)外同類產(chǎn)品Competitor P、Competitor P2.0的檢測(cè)效果比較參見圖1。

圖1. 本產(chǎn)品CellTiter-Lumi™ Plus Luminescent Cell Viability Assay Kit (CTL Plus)和國(guó)外同類競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品Competitor P、Competitor P2.0對(duì)不同細(xì)胞的檢測(cè)效果。圖A-C為CTL Plus和Competitor P對(duì)不同數(shù)量HeLa細(xì)胞在白色96孔板中的檢測(cè)效果，圖D為CTL Plus、Competitor P和Competitor P2.0對(duì)10萬個(gè)/孔NIH3T3、HeLa和Jurkat細(xì)胞在白色96孔板中的檢測(cè)效果。實(shí)際讀數(shù)會(huì)因細(xì)胞種類、檢測(cè)儀器等的不同而存在差異，圖中數(shù)據(jù)僅供參考。

本產(chǎn)品操作簡(jiǎn)單，讀數(shù)穩(wěn)定，檢測(cè)速度快，完成檢測(cè)僅需約10分鐘。本產(chǎn)品比常見的MTT、alamarBlue、Calcein-AM、WST-1、CCK-8等其它細(xì)胞活力測(cè)定方法更加簡(jiǎn)單快捷。只需把試劑盒提供的單一即用型試劑CellTiter-Lumi™ Plus發(fā)光法檢測(cè)試劑與培養(yǎng)細(xì)胞等體積混合，反應(yīng)10分鐘后即可進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測(cè)。無需洗滌細(xì)胞，也無需更換或去除培養(yǎng)液。并且化學(xué)發(fā)光非常穩(wěn)定，在反應(yīng)開始后的10分鐘內(nèi)無顯著變化，30分鐘內(nèi)的下降不超過10%。
本產(chǎn)品穩(wěn)定性好。本試劑盒中的CellTiter-Lumi™ Plus發(fā)光法檢測(cè)試劑穩(wěn)定性好，反復(fù)凍融5次對(duì)檢測(cè)效果基本無影響，反復(fù)凍融10次檢測(cè)效果下降不超過10%。本產(chǎn)品4℃保存3天對(duì)檢測(cè)效果無顯著影響，4℃保存7天檢測(cè)效果下降不超過10%。室溫保存1天，仍可保留80%以上的檢測(cè)效果。37℃保存1天，可保持60%以上的檢測(cè)效果。本產(chǎn)品即使僅保留約50%的檢測(cè)效果，仍可以滿足各種常規(guī)檢測(cè)。
本產(chǎn)品使用靈活便捷。本產(chǎn)品不僅適合少量樣品的檢測(cè)，也非常適合大量樣品的高通量篩選(high-throughput screening)檢測(cè)。
ATP，作為最重要的能量分子，在細(xì)胞的各種生理、病理過程中起著重要作用。ATP是細(xì)胞新陳代謝的一個(gè)重要指標(biāo)，也是具有代謝活性細(xì)胞的重要標(biāo)志性分子，并和活細(xì)胞數(shù)目成良好的線性關(guān)系。因此，ATP含量能很好地反應(yīng)活細(xì)胞的數(shù)目，即本試劑盒可以通過測(cè)定ATP含量來進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)或檢測(cè)細(xì)胞活力。
本試劑盒通過ATP檢測(cè)細(xì)胞活力的原理參見圖2。借助ATP依賴的螢光素酶催化的螢光素發(fā)光反應(yīng)，ATP可以通過測(cè)定化學(xué)發(fā)光來進(jìn)行定量。由于ATP含量能很好地反映活細(xì)胞的數(shù)目，而ATP含量和發(fā)光強(qiáng)度成正比，這樣就可以簡(jiǎn)單地通過化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度來計(jì)算出細(xì)胞活力或細(xì)胞數(shù)目。

圖2. 發(fā)光試劑盒檢測(cè)ATP的原理圖。

碧云天各種細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒的比較和選擇，請(qǐng)參考試劑盒使用說明書。
對(duì)于96孔板，推薦使用100μl細(xì)胞培養(yǎng)液和100μl的檢測(cè)試劑，總體積為200μl，此時(shí)本試劑盒每10ml可以進(jìn)行100次檢測(cè)。對(duì)于384孔板，推薦使用25μl細(xì)胞培養(yǎng)液和25μl的檢測(cè)試劑，總體積為50μl，此時(shí)本試劑盒每10ml可以進(jìn)行400次檢測(cè)。也可以用其它體積的試劑進(jìn)行檢測(cè)，但細(xì)胞培養(yǎng)液和檢測(cè)試劑體積的比例須為1:1。雖然有數(shù)據(jù)顯示適當(dāng)減少檢測(cè)試劑的用量也很可能會(huì)得到較好的結(jié)果，但對(duì)于細(xì)胞數(shù)量偏多、細(xì)胞數(shù)量特別少或者重復(fù)性要求比較高的情況，建議按照推薦用量進(jìn)行檢測(cè)。
包裝清單：

保存條件：

-20℃避光保存，至少一年有效。
注意事項(xiàng)：
發(fā)光法細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒的檢測(cè)試劑中含有螢光素酶，反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致其逐漸失活。盡管經(jīng)測(cè)試本試劑反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響，為取得良好的使用效果，次解凍后可適當(dāng)分裝保存，但需注意分裝的容器不能有ATP污染。反復(fù)凍融過程中，可能會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)試劑中出現(xiàn)少量沉淀，此時(shí)宜平衡至室溫，并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物，可以離心去除后使用，經(jīng)測(cè)試不會(huì)影響后續(xù)的檢測(cè)效果。
待測(cè)藥物的溶劑含量較高時(shí)可能會(huì)干擾螢光素酶反應(yīng)，從而影響化學(xué)發(fā)光信號(hào)?？梢酝ㄟ^設(shè)置含有溶劑的細(xì)胞培養(yǎng)液對(duì)照孔排除溶劑的干擾。經(jīng)測(cè)試，最終反應(yīng)體系中DMSO含量在2%以內(nèi)不會(huì)對(duì)反應(yīng)產(chǎn)生影響。
檢測(cè)時(shí)需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板，相鄰孔之間會(huì)產(chǎn)生相互干擾。
使用說明中提供了檢測(cè)ATP標(biāo)準(zhǔn)品的方法，實(shí)際檢測(cè)細(xì)胞活力時(shí)通常并不需要檢測(cè)ATP標(biāo)準(zhǔn)品。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

常見問題：
1.Luminometer和熒光分光光度計(jì)有何不同？
熒光分光光度計(jì)檢測(cè)的樣品本身不能發(fā)光，樣品需要由特定波長(zhǎng)的激發(fā)光激發(fā)，然后才能產(chǎn)生熒光并被熒光分光光度計(jì)檢測(cè)。Luminometer檢測(cè)的樣品本身可以發(fā)光，不需要激發(fā)光進(jìn)行激發(fā)。也就是說luminometer是檢測(cè)化學(xué)發(fā)光(螢光)的儀器。有些型號(hào)的熒光分光光度計(jì)也具有l(wèi)uminometer的功能，即也可以檢測(cè)化學(xué)發(fā)光。您所使用的熒光分光光度計(jì)能否用于化學(xué)發(fā)光的測(cè)定請(qǐng)仔細(xì)閱讀該儀器的說明書。
2. 可以進(jìn)行螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)的儀器是否就可以用于本試劑盒的檢測(cè)？
是。螢光素酶報(bào)告基因的檢測(cè)原理和本試劑盒的原理相同，可以用相同的儀器測(cè)定。