嬰幼兒食品和乳品中脂肪酸的氣相色譜測(cè)定
嬰幼兒食品和乳品中脂肪酸的測(cè)定（乙酰氯—甲醇甲酯化法）
測(cè)定原理：
乙酰氯與甲醇反應(yīng)得到的鹽酸—甲醇使試樣中的脂肪和游離脂肪酸甲酯化，用甲苯提取后，經(jīng)嬰幼兒食品和乳品中脂肪酸檢測(cè)色譜儀分離檢測(cè)，外標(biāo)法定量。
本方法依據(jù)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 5413.27—2010嬰幼兒食品和乳品中脂肪酸的測(cè)定》方法中規(guī)定。
嬰幼兒食品和乳品中脂肪酸檢測(cè)色譜儀儀器和設(shè)備
1、萬(wàn)分之一電子天平；
2、恒溫?zé)崴〔郏?/p>
3、離心機(jī)：轉(zhuǎn)速≥5000 轉(zhuǎn)/分鐘，離心管：50mL；
4、GC-6960氣相色譜儀，帶FID 檢測(cè)器，毛細(xì)管分流/不分流進(jìn)樣及尾吹系統(tǒng)；
5、冷凍干燥儀；
6、氮吹儀；
7.、PC2560毛細(xì)管柱（100*0.25*0.20）；
測(cè)定試劑：
1、；
2、甲苯；
3、乙酰氯；
4、乙酰氯甲醇溶液；
5、碳酸鈉溶液；
6、脂肪酸甘油三酯標(biāo)準(zhǔn)品：純度≥99 %；
測(cè)定分析步驟：
1.試樣處理
試樣含水量大于5%時(shí)，冷凍干燥至含水量小于5%。
稱取試樣0.5 g（精確到0.1 mg）于15 mL 干燥螺口玻璃管中，加入5.0mL甲苯。
稱取無(wú)水奶油試樣0.2g（精確到0.1mg）于15mL干燥螺口玻璃管中，加入5.0mL甲苯。
2.甲酯化提取
2.1試樣測(cè)定液的制備
在試樣中加入10%乙酰氯甲醇溶液6.0mL，充氮?dú)夂?，旋緊螺旋蓋，振蕩混合后于80℃±1℃水浴中放置2h，期間每隔20min取出振搖一次，水浴后取出冷卻至室溫。將反應(yīng)后的樣液轉(zhuǎn)移至50mL離心管中，分別用3.0mL碳酸鈉溶液清洗玻璃管三次，合并碳酸鈉溶液于50mL離心管中，混勻，5000 轉(zhuǎn)/分鐘離心約5min。取上清液作為試液，氣相色譜儀測(cè)定。
2.2標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定液的制備
準(zhǔn)確吸取脂肪酸甘油三酯標(biāo)準(zhǔn)工作液0.5mL于15mL螺口玻璃管中，加入4.5mL甲苯，其他操作步驟同2.1。
色譜參考條件：
色譜柱：PC2560100m×0.25mm，0.20um
氣源：氮?dú)猓?9.999%）、氫氣（99.999%）、空氣（99.999%）
載氣流速：1.0mL/min
進(jìn)樣口溫度：260℃
分流比：30：1
檢測(cè)器溫度：280℃
柱溫箱溫度：初始溫度140℃，保持5min，以4℃/min升溫至240℃，保持15min
試樣溶液的測(cè)定：
分別準(zhǔn)確吸取1.0μL脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定液及試樣測(cè)定液注入色譜儀，平行測(cè)定次數(shù)不少于兩次，以色譜峰峰面積定量。
