Matrix-Gel™基質膠(標準型，不含酚紅)
即基底膜基質，又稱ECM (Extracellular Matrix)或BME (Basement Membrane Extract)凝膠，不含乳糖脫氫酶增高病毒(Lactate dehydrogenase elevating virus, LDEV)。基質膠廣泛用于血管生成、腫瘤細胞遷移、體內腫瘤模型的建立、3D腫瘤細胞模型和類器官(Organo
Matrix-Gel™基質膠(標準型，不含酚紅)，英文名為Matrix-Gel™ Basement Membrane Matrix，即基底膜基質，又稱ECM (Extracellular Matrix)或BME (Basement Membrane Extract)凝膠，不含乳糖脫氫酶增高病毒(Lactate dehydrogenase elevating virus, LDEV)?；|膠廣泛用于血管生成、腫瘤細胞遷移、體內腫瘤模型的建立、3D腫瘤細胞模型和類器官(Organoid)等研究領域。本產品與Corning® Matrigel®性能基本一致，甚至更優(yōu)，相應產品可以替代。
Matrix-Gel™基質膠(標準型，不含酚紅)是從富含胞外基質蛋白的EHS (Engelbreth-Holm-Swarm)小鼠腫瘤中提取的基底膜基質，其主要成分為層粘連蛋白，還含有IV型膠原、硫酸肝素糖蛋白、巢蛋白、各種生長因子、組織纖溶酶原激活物和微量的基質金屬蛋白酶等。全系列產品均不含乳酸脫氫酶增高病毒或其它小鼠和腫瘤來源的病毒。在室溫條件下，基質膠可快速聚合形成具有生物學活性的三維(3D)培養(yǎng)基質，模擬體內細胞基底膜的結構、組成、物理特性和功能，可促進血管內皮細胞、上皮細胞、肝細胞、神經元、黑色素瘤細胞、甲狀腺細胞及毛囊細胞等不同細胞的附著、維持、生長與分化[1-6]，可用于對細胞形態(tài)、生化功能、遷移、侵襲和基因表達等的研究。
Matrix-Gel™基質膠系列產品有含/不含酚紅的標準型(Standard)、低生長因子(Growth Factor Reduced, GFR)、高濃度(High Concentration, HC)、高濃度低生長因子(HC, GFR)、干細胞用(hESC-Qualified)、類器官用(For Organoid Culture)等不同生長因子、蛋白濃度含量、不同用途的多種類型的基質膠。不含酚紅的Matrix-Gel™基質膠適用于熒光檢測或顯色反應等分析；低生長因子的Matrix-Gel™基質膠適用于對基質成分要求嚴格的實驗，如細胞信號通路和細胞因子等的研究；高濃度的Matrix-Gel™基質膠適用于研究血管生成、腫瘤細胞遷移和體內腫瘤模型的建立等?？筛鶕?jù)實驗需求并參考下表選擇合適的基質膠產品。
| Matrix-Gel™基質膠系列產品 | ||||||
| 產品類型 | 標準型 (Standard) | 低生長因子 (Growth Factor Reduced) | 高濃度 (High Concentration) | 高濃度低生長因子 (HC, GFR) | 干細胞用 (hESC-Qualified) | 類器官用 (For Organoid Culture) |
| 貨號 | C0371/C0372 (含/不含酚紅) | C0375/C0376 (含/不含酚紅) | C0382/C0383 (含/不含酚紅) | C0386/C0387 (含/不含酚紅) | C0391/C0392 (含/不含酚紅) | C0395/C0396 (含/不含酚紅) |
| 包裝 | 1ml/5ml/10ml/50ml | |||||
| 來源 | EHS小鼠腫瘤 | |||||
| 蛋白濃度 | 8-13mg/ml | 8-13mg/ml | 16-26mg/ml | 16-26mg/ml | 8-13mg/ml | 8-13mg/ml |
| VEGF濃度 | 5.0-7.5ng/ml | 1.0-1.5ng/ml | 5.0-7.5ng/ml | 1.0-1.5ng/ml | 5.0-7.5ng/ml | 1.0-1.5ng/ml |
| 緩沖溶液 | 低糖DMEM培養(yǎng)液(含50μg/ml慶da霉素)；本基質膠兼容所有培養(yǎng)基。 | |||||
| 用途 | 常規(guī)的細胞實驗，如2D、3D細胞培養(yǎng)、血管生成、細胞侵襲等。根據(jù)蛋白濃度要求，也可以用于體內實驗。 | 降低了細胞因子本底水平的干擾，適合需要成分高度明確或基因表達檢測等的基質膠的應用。也可以用于3D細胞培養(yǎng)、血管生成、細胞侵襲、類器官培養(yǎng)等。 | 高濃度的蛋白使基質膠更具基質剛度和支架完整性。適用于體內成瘤實驗、血管生成、3D細胞培養(yǎng)及常規(guī)細胞培養(yǎng)等。 | 既需要高濃度蛋白又需要降低細胞因子的基質膠應用。 | 人胚胎干細胞(Human Embryonic Stem Cell, hESC)、誘導多能性干細胞(Induced Pluripotency Stem Cell, iPSC)適用基質膠。 | 適用于類器官研究，為類器官生長提供必要的生長因子、蛋白質和所需的基質結構，常用于類器官的生長和分化研究。 |
| 酚紅 | 不同性質的基質膠產品均提供含/不含酚紅兩個版本，不含酚紅的版本適用于需要顏色檢測的實驗，如比色法、熒光檢測等。 | |||||
本基質膠的組成類似于保守的、早期發(fā)育的基底膜。本基質膠主要成分由約60%的層粘連蛋白(Laminin)，約30%的IV型膠原蛋白(Collagen IV)和約8%的巢蛋白(Entactin)組成[7-8]，其中Entactin是一種橋接分子，它能夠與層粘連蛋白和IV型膠原蛋白相互作用，從而有助于細胞外基質分子結構組織的形成。除了主要成分外，基質膠中還包含一些蛋白聚糖以及生長因子，如硫酸肝素蛋白聚糖(Perlecan)、血管內皮生長因子(VEGF)、轉化生長因子-β (TGF-β)、表皮生長因子(EGF)、胰島素樣生長因子(IGF)、成纖維細胞生長因子(FGF)、組織纖溶酶原激活物(PLAT)及腫瘤中自然存在的生長因子，另外還有殘留的腫瘤細胞來源的基質金屬蛋白酶等[9-10]。
本基質膠在室溫條件下快速聚合。本基質膠在10℃以上會開始凝膠化，在22-37℃時，基質膠大分子間可以通過化學鍵互相結合，促使基質膠快速聚合形成3D凝膠基質，而在一定范圍的低溫(如4℃)條件下由于沒有足夠的能量促使化學鍵結合，基質膠呈現(xiàn)液體狀態(tài)。
本基質膠可以滿足不同的實驗需要。基質膠的蛋白質濃度越高，粘稠度也越高。非高濃度基質膠的蛋白濃度為8-13mg/ml，高濃度基質膠的蛋白濃度為16-26mg/ml，基質膠成膠濃度為3mg/ml，為避免成膠不完quan，用于體內研究的基質膠的終濃度不應低于4mg/ml。
本基質膠經嚴格的質量控制，品質高。每批次相關產品都經過嚴格的蛋白濃度、內毒素、凝膠、血管生成、腫瘤細胞3D培養(yǎng)、類器官培養(yǎng)、生物活性、無菌性(細菌、真菌、病毒、支原體)等檢測。
本系列基質膠產品在各個應用中的效果參見圖1-圖7。
圖1. Matrix-Gel™基質膠(高濃度,低生長因子) (C0386/C0387)用于免疫缺陷小鼠皮下成瘤實驗的效果圖。選擇大小相近、生命體征相近的4-5周雄性裸鼠，分別接種HCT 116 (人結腸癌細胞)細胞懸液及1:1混合基質膠(高濃度)的HCT 116細胞懸液，細胞數(shù)量為每只裸鼠80萬個細胞，經過11天飼養(yǎng)后分離取出腫瘤。與僅注射HCT 116細胞懸液的對照組相比，混合基質膠(高濃度)的HCT 116細胞懸液注射組小鼠的腫瘤體積明顯更大，成瘤速度更快，成瘤效果更好。實際效果會因細胞種類、實驗條件的不同而存在差異，本圖僅供參考。
圖2. Matrix-Gel™基質膠(標準型) (C0371/C0372)和Matrix-Gel™基質膠(高濃度) (C0382/C0383)用于血管生成實驗的效果圖。分別使用未經稀釋的Matrix-Gel™基質膠、Matrix-Gel™基質膠和DMEM按照2:1 (即66.7%)、1:1 (即50%)混合的混合液，取50μl平鋪至96孔板中，待基質膠凝固后，加入約3萬個細胞懸液，圖A為Matrix-Gel™基質膠(標準型)用于HUVEC (人臍靜脈內皮細胞)的血管生成效果，圖B為Matrix-Gel™基質膠(高濃度)用于RLSEC (大鼠肝竇內皮細胞)的血管生成效果，培養(yǎng)時間為4小時，均可以觀察到顯著的管腔樣結構。實際效果會因細胞種類、實驗條件的不同而存在差異，本圖僅供參考。
圖3. Matrix-Gel™基質膠(標準型)(C0371/C0372)用于Transwell侵襲實驗的效果圖。將基質膠1:8稀釋，平鋪在Transwell小室的上側，37℃凝膠2小時后，加培養(yǎng)液水化30分鐘，棄上清，在小室中加入約5萬個細胞/孔的HCT 116 (人結腸癌細胞)細胞懸液，并把Transwell小室下側浸沒在含血清培養(yǎng)液中，培養(yǎng)48小時后經固定、結晶紫染色后的效果。實際效果會因細胞種類、實驗條件的不同而存在差異，本圖僅供參考。
圖4. Matrix-Gel™基質膠(低生長因子) (C0375/C0376)用于小鼠膽管(Bile duct)、氣道上皮(Airway epithelium)類器官的培養(yǎng)效果圖。分離小鼠膽管和氣道上皮細胞，包埋于基質膠后，接種于培養(yǎng)板上進行誘導培養(yǎng)，建立原代小鼠膽管和氣道上皮類器官。圖A為小鼠膽管類器官培養(yǎng)4天的形態(tài)圖，圖B為小鼠氣道上皮類器官培養(yǎng)4天的形態(tài)圖，培養(yǎng)狀態(tài)均良好。實際效果會因細胞種類、實驗條件的不同而存在差異，本圖僅供參考。
圖5. Matrix-Gel™基質膠(類器官用) (C0395/C0396)用于小鼠小腸(Small intestine)類器官的培養(yǎng)效果圖。分離小鼠小腸隱窩細胞，包埋于基質膠后，接種于培養(yǎng)板上進行誘導培養(yǎng)，建立原代小鼠小腸類器官，并進行傳代擴增。連續(xù)7代(P1-P7)傳代后，類器官活力良好，增殖能力強，維持了明顯的隱窩樣結構特征(圖A)和隱窩樣的分枝結構(圖B)。實際效果會因組織種類、實驗條件的不同而存在差異，本圖僅供參考。
圖6. Matrix-Gel™基質膠(標準型) (C0371/C0372)和Matrix-Gel™基質膠(高濃度) (C0382/C0383)用于3D腫瘤球形成實驗的效果圖。取狀態(tài)良好的HepG2 (人肝癌細胞)和SGC-7901 (人胃癌細胞)細胞，yi酶消化后獲得細胞懸液，分別與Matrix-Gel™基質膠(標準型)和Matrix-Gel™基質膠(高濃度)1:1混合后，滴加至96孔板中，待膠滴凝固后，添加含10% FBS的培養(yǎng)液，培養(yǎng)五天后，可以形成球體樣結構。實際效果會因細胞種類、實驗條件的不同而存在差異，本圖僅供參考。
圖7. Matrix-Gel™基質膠(干細胞用) (C0391/C0392)用于ES細胞(Embryonic stem cells, ES cells)的培養(yǎng)效果圖。使用Matrix-Gel™基質膠(干細胞用)培養(yǎng)ES細胞1-8天，顯示Matrix-Gel™基質膠(干細胞用)可以滿足ES細胞的培養(yǎng)需求，細胞生長狀態(tài)良好。實際效果會因細胞種類、實驗條件的不同而存在差異，本圖僅供參考。
包裝清單：
| 產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
| C0372-1ml | Matrix-Gel™基質膠(標準型，不含酚紅) | 1ml |
| C0372-5ml | Matrix-Gel™基質膠(標準型，不含酚紅) | 5ml |
| C0372-10ml | Matrix-Gel™基質膠(標準型，不含酚紅) | 10ml |
| C0372-50ml | Matrix-Gel™基質膠(標準型，不含酚紅) | 10ml×5 |
| — | 說明書 | 1份 |
保存條件：
-20℃或以下避光保存，兩年有效。初次解凍后請適當分裝，避免反復凍融。
注意事項：
本產品干冰運輸，解凍前為固態(tài)。若到貨后泡沫盒中無干冰，且基質膠呈凝膠狀而非液態(tài)化，請及時聯(lián)系碧云天。到貨后若不分裝或直接用于實驗，請立刻置于-20℃或以下溫度避光保存。
本基質膠不可反復凍融。為保證基質膠的使用效果，如有必要請收到本產品后按照單次用量分裝，盡可能減少凍融次數(shù)，或直接訂購碧云天的1ml小包裝的本產品。
基質膠須-20℃或以下避光保存，在保存過程中，本產品需維持在凍結狀態(tài)。由于無霜冰箱的自動除霜功能可能影響冰箱內的溫度，因此不建議將本產品儲存在無霜冰箱中。
本基質膠的蛋白質濃度具有批次差異性，一般都標示在西林瓶的標簽上，請根據(jù)標示的蛋白濃度、所需蛋白濃度，確定基質膠的用量以獲得一致性結果。具體稀釋濃度應根據(jù)實驗進行優(yōu)化。
使用本產品時應注意無菌操作，避免污染。解凍后，請將本產品放置在無菌的區(qū)域，在頂部噴灑70%乙醇消毒并風干。
解凍的基質膠避光放置于4℃冰箱或冰上可以保持30天左右的液態(tài)化，但仍建議解凍后就進行分裝或用于相關實驗。
由于二氧化碳和碳酸氫鹽緩沖液以及酚紅(如有)的作用，本基質膠在凍融的過程中可能會發(fā)生顏色的變化。顏色的變化是正?，F(xiàn)象，不影響產品使用效果。
實驗過程中拿取基質膠的時候需注意手不可接觸基質膠部位的瓶身，避免體溫引起的基質膠凝固，應用手指持住裝有基質膠的瓶子/管子上方。
實驗完畢后，剩余的基質膠不可留待下次使用。
本產品僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
