天然提取物中通常包含多酚類、類胡蘿卜素類、黃酮類和脂類等結(jié)構(gòu)類似物,它們的差異可能僅僅體現(xiàn)在雙鍵的數(shù)量或位置、烷基側(cè)鏈的長度不同。傳統(tǒng)的一維液相色譜儀系統(tǒng)無法達(dá)到足夠的分離效率來充分地分離這樣的混合物。因此,通過全二維液相色譜將兩種獨(dú)立的分離模式結(jié)合起來(比如正相和反相),經(jīng)一次分析,就能夠全面而充分地分離此類混合物。
Nexera-e通過對(duì)洗脫液進(jìn)行精細(xì)餾分捕集可以達(dá)到可能的峰容量,并且憑借其雙樣品環(huán)交替切換設(shè)計(jì),連續(xù)地將所有餾分在線注入第二維系統(tǒng)。Nexera-e結(jié)合日本島津公司的二維液相色譜陣容,使得主要推向制藥和臨床市場(chǎng)的Co-Sense系列(可用于生物樣本分析(BA)或用于雜質(zhì)分析)頗具特色。由于能對(duì)復(fù)雜基質(zhì)的樣品進(jìn)行全面的分析,Nexera-e非常適用于各種研究領(lǐng)域和應(yīng)用領(lǐng)域,包括蛋白水解、食品和天然提取物。
(1) 增強(qiáng)型分離和高速分析的性能
Nexera-e具有出色的峰容量,遠(yuǎn)遠(yuǎn)超越了普通的液相色譜,從而使得該系統(tǒng)能夠?qū)ψ匀惶崛∥锖推渌麖?fù)雜基質(zhì)中的結(jié)構(gòu)類似物進(jìn)行高效分離。
傳統(tǒng)全二維液相色譜系統(tǒng)在維系統(tǒng)使中用低流速,在第二維系統(tǒng)運(yùn)用具有快速分析周期的超快速分析。Nexera-e系統(tǒng)中,LC-30AD可以為和第二維液相色譜分析提供廣泛的分離參數(shù)。10mL的微體積柱塞確保為維分析在低流速時(shí)提供穩(wěn)定的液流,同時(shí)在第二維分析中,的130 MPa系統(tǒng)耐受壓力可以保證在使用亞2微米填料色譜柱進(jìn)行超快速及超高壓分析時(shí),提供1-3 mL/min的穩(wěn)定液流。此外,即使某個(gè)化合物在從維液相導(dǎo)入第二維液相時(shí)被切割成多個(gè)餾分,LC-30AD出色的保留時(shí)間重現(xiàn)性依舊能夠確保可靠的數(shù)據(jù)分析。同時(shí),Nexera-e系統(tǒng)中兩個(gè)循環(huán)使用的樣品環(huán)內(nèi)部體積差別極小,可從上保證數(shù)據(jù)的重現(xiàn)性。
(2) 對(duì)目標(biāo)混合物進(jìn)行可靠的分析:高靈敏度液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法和二極管列陣檢測(cè)器
Nexera-e可以和高靈敏度的LC/MS/MS、LCMS-IT-TOF以及SPD-M30A聯(lián)用。LCMS-8030/8040/8050擁有的靈敏度,通過其超速的正/負(fù)離子切換(UFswitching)和和超快速掃描(UFscanning)而輕松快捷地分析結(jié)構(gòu)類似物。流通池光程長為85 mm的光電二極管陣列檢測(cè)器SPD-M30A能夠?qū)ξ⒘砍煞诌M(jìn)行高靈敏度分析。
(3) 輕松分析大量數(shù)據(jù):ChromSquare軟件
Nexera-e全二維液相色譜數(shù)據(jù)分析軟件——ChromSquare LC′LC,采用交互式用戶界面,使用戶一看便能獲得每個(gè)“點(diǎn)”的詳細(xì)信息。ChromSquare軟件可在同一屏幕上顯示等高線圖(一般視圖和放大視圖),MS/MS譜圖和第二維分析所得MS譜圖。因此,在等高線圖顯示區(qū)選中的線點(diǎn)信息和MS譜圖及色譜圖一起顯示,便于查看和分析數(shù)據(jù)。
由于結(jié)合了兩種分離模式,收集在樣品環(huán)中來自維液相色譜儀的餾分,可能會(huì)在第二維分析中充當(dāng)樣品溶劑。在這種情況下,分離及/或色譜峰形可能由于溶劑效應(yīng)而變形。
用于生成Nexera-e方法的LC′LC輔助軟件,包含一個(gè)自動(dòng)梯度功能。這使得在維梯度洗脫的基礎(chǔ)上,創(chuàng)建或改變第二維梯度洗脫參數(shù)變得簡單。這樣很好的解決了第二維色譜中各成分的分離和色譜峰形的難題。