即使對(duì)于高濃度樣品,也無(wú)需稀釋,就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。紫外分光光度計(jì)可以在紫外可見(jiàn)光區(qū)任意選擇不同波長(zhǎng)的光。物質(zhì)的吸收光譜就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(zhǎng)的光能量,相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同,因此,每種物質(zhì)就有其的、固定的吸收光譜曲線(xiàn),可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量。相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果。先確定實(shí)驗(yàn)條件,并在此條件下測(cè)得標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的吸收峰以及其對(duì)應(yīng)波長(zhǎng)值(同時(shí)可獲得該物質(zhì)的大吸收波長(zhǎng));再在選定的波長(zhǎng)范圍內(nèi)(或大波長(zhǎng)值處),分別以(不同濃度)標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度和溶液濃度為橫、縱坐標(biāo)繪出化合物溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)得到其所對(duì)應(yīng)的數(shù)學(xué)方程;接著在相同實(shí)驗(yàn)條件下配制待測(cè)溶液,測(cè)得待測(cè)溶液的吸光度,后用已獲得的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)方程求出待測(cè)溶液中所需測(cè)定的化合物的含量。
凡具有芳香環(huán)或共軛雙鍵結(jié)構(gòu)的有機(jī)化合物,根據(jù)在特定吸收波長(zhǎng)處所測(cè)得的吸收度,可用于藥品的鑒別、純度檢查及含量測(cè)定。