MICRO-LED120 熒光成像LED光源
MICRO-LED120 熒光成像LED光源
利用熒光分子標(biāo)記細(xì)胞樣品中某些特定結(jié)構(gòu)或成分，用波長較短的光激發(fā)這些熒光分子使其處于高能態(tài)，再對其退激過程中所發(fā)射的波長相對較長的熒光進(jìn)行顯微成像，即為熒光顯微術(shù)。采用該技術(shù)，不僅可以克服普通光學(xué)顯微術(shù)難以直接對無色透明的細(xì)胞樣品進(jìn)行成像的缺點(diǎn)，更重要的是還能通過標(biāo)記細(xì)胞中特定的結(jié)構(gòu)或者分子、離子實(shí)現(xiàn)“功能成像”。由于離焦干擾等原因，普通寬場熒光顯微術(shù)分辨率并不高，但利用一些特殊技術(shù)可以顯著提高分辨率和對比度。
LED120是熒光成像應(yīng)用的緊湊、易用型白色 LED 光源。通過直接耦合，憑借寬的熒光激發(fā)光譜，可提供**的 LED 照明表現(xiàn)和針對樣本的均勻照明區(qū)域，可采用手動和 TTL 三種方式控制，針對任何儀器配置都能提供便利的控制選項(xiàng)，從基本操作到全自動操作。LED 保固使用壽命長達(dá) 20,000 小時，無需更換燈泡或光導(dǎo)管組件，幾乎不需要任何維護(hù)，而且采用緊湊型設(shè)計(jì)，所需的放置空間極小。
LED熒光光源在熒光成像系統(tǒng)中因其小巧、長壽命、低熱量輸出和對生物細(xì)胞較低的光毒性而受到青睞。與汞弧燈相比，LED不僅減少了對環(huán)境的影響（無汞），而且降低了細(xì)胞的光毒性和光漂白效應(yīng)，有利于長期細(xì)胞成像。此外，LED光源能夠快速開關(guān)，保證了每次曝光時光劑量的可重復(fù)性，對于定量分析至關(guān)重要。
功能和優(yōu)勢
功能 | 益處 |
LED 技術(shù) | 高效、穩(wěn)定、即時開/關(guān)、使用壽命長 |
白光激發(fā) | DAPI、CFP、GFP/FITC、YFP、mCherry/Texas Red 和 Cy5 等常用熒光激發(fā) |
直接耦合 | 高功率激發(fā) |
多種控制方式 | 操作簡單 |
占用空間小 | 最小的空間要求；使用較少的臺頂面積 |
經(jīng)過優(yōu)化的熱管理 | 實(shí)現(xiàn)**的 LED 輸出、壽命、穩(wěn)定性和可靠性 |
耦合光學(xué)元件 | 采用**性能的耦合光學(xué)元件，可提供高效的光學(xué)輸出和均勻度 |
產(chǎn)品特點(diǎn)
1.更高亮度的LED光源：新品采用了更高亮度的LED光源，能夠在保證光譜范圍小的同時，提供更強(qiáng)的熒光激發(fā)能力。這使得熒光圖像更加明亮、清晰，便于科研工作者捕捉和觀察樣本的細(xì)微變化。
2.更精確的電動控制：通過優(yōu)化電動控制系統(tǒng)，新品實(shí)現(xiàn)了更加精確的熒光通道切換和亮度調(diào)節(jié)。用戶可以輕松地在明場和熒光觀察方式之間切換，同時根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)需求調(diào)節(jié)亮度，以獲得**的圖像效果。
3.更多樣化的濾光片選擇：為了滿足不同熒光染料的觀察需求，新品提供了更多樣化的濾光片選擇。用戶可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的濾光片組合，以獲得更加準(zhǔn)確的熒光圖像。
4.更人性化的操作界面：新品升級了7英寸觸控液晶屏控制界面，使得用戶操作更加便捷、直觀。用戶可以通過簡單的觸摸操作實(shí)現(xiàn)通道切換、亮度調(diào)節(jié)等功能，大大提高了工作效率。
5.更穩(wěn)定的外置電源箱：為了確保電源的穩(wěn)定性和安全性，新品采用了更加穩(wěn)定的外置電源箱設(shè)計(jì)。這不僅保證了光源的穩(wěn)定輸出，還減少了顯微鏡上的空間占用，使得用戶更加方便地操作和調(diào)整。
技術(shù)規(guī)格
波長范圍 | 370-700nm |
波長范圍 | 370-700nm |
電源 | 通用輸入 100-240VAC, 50/60Hz |
功耗 | 150W |
LED 開/關(guān)響應(yīng)時間 | 85µs TTL；1ms USB |
控制方式 | ON/OFF – TTL 兼容 |
speedDIAL | |
RS-232 指令（SDK 可用 | |
USB | |
尺寸 – 燈頭 | 100 mm x 135 mm x 110 mm (B x H x T) |
尺寸 – 控制器 | 180 mm x 110 mm x 230 mm (B x H x T) |
重量 | 3,4 kg (7.5 lb) |
認(rèn)證 | RoHS, CE |
質(zhì)保 | LED – 20,000 小時； |
熒光團(tuán)
熒光團(tuán) | 熒光團(tuán)波長 (nm) |
DAPI | 385nm |
CFP | 435nm |
GFP/FITC | 470nm |
YFP | 510nm |
TRITC/Cy3/RFP/mCherry | 560nm |
MitoTracker® Red CMXROS | 580nm |
Cy5 | 640nm |
濾光片推薦
Fluorophor | Semrock濾光片 | Chroma濾光片 |
DAPI | DAPI 5060-C | 49028 |
CFP | CFP-2432C | 49001 |
CFP/YFP FRET | FRET CFP/YFP-C | 89002 |
FITC | FITC-5050-A | 49002 |
GFP | GFP-4050B | mCherry |
mCherry-B | 49008 | Cy5 |
Cy5-4040C | 49006 |
熒光顯微術(shù)（僅供學(xué)習(xí)）
1.共聚焦激光掃描顯微術(shù)
共聚焦激光掃描顯微術(shù)（Confocal Laser Scanning Microscopy, CLSM）的基本原理是利用一對共軛針孔進(jìn)行“空間濾波”，將焦平面以外的雜散光濾除以提高縱向分辨率，實(shí)現(xiàn)非侵入式的“光學(xué)切片”。CLSM的橫向分辨率約為100-200 nm，縱向分辨率可達(dá)500 nm，大大優(yōu)于普通非共焦方式的熒光顯微術(shù)；同時共焦針孔的應(yīng)用也極大地提高了圖像信噪比。這些優(yōu)點(diǎn)使CLSM被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)的研究，尤其是亞細(xì)胞層次空間結(jié)構(gòu)和功能的研究。
然而CLSM采用的是逐點(diǎn)掃描的成像方式，成像速度受到限制。近年來發(fā)展起來的轉(zhuǎn)盤式共聚焦顯微術(shù)（Spinning Disk Confocal Microscopy, SDCM）仍利用CLSM的共焦針孔原理，但由于采用高速旋轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)盤實(shí)現(xiàn)了非常多焦點(diǎn)的近似面照明，所得熒光可以采用CCD采集，在保持圖像質(zhì)量達(dá)到傳統(tǒng)CLSM水平的同時成像速度可達(dá)視頻要求，成為活細(xì)胞內(nèi)單分子熒光成像的有力工具。
共聚焦激光顯微術(shù)（左）和轉(zhuǎn)盤式共聚焦顯微術(shù)（右）原理示意圖
2.全內(nèi)反射熒光顯微術(shù)
當(dāng)一束光從光密介質(zhì)射向光疏介質(zhì)時，并且入射角大于臨界角時，將發(fā)生全內(nèi)反射（Total Internal Reflection, TIR）。由于光的波動效應(yīng)，此時仍會有少量光能量穿透界面并沿著平行界面的方向傳播，稱為隱失波（Evanescent Wave）全內(nèi)反射熒光顯微術(shù)（TIR Fluorescence Microscopy, TIRFM）就是利用這種隱失波來激發(fā)樣品熒光的，由于其穿透深度一般只有100-200 nm，因而縱向分辨率和圖像信噪比均大大提高。常見的TIRFM有棱鏡型和物鏡型兩類。TIRFM一般應(yīng)用于研究細(xì)胞膜或膜內(nèi)附近區(qū)域的動態(tài)過程，如信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等。
棱鏡型（左）和物鏡型（右）全內(nèi)反射熒光顯微術(shù)示意圖
電光源顯微鏡的照明光源，主要有鹵素?zé)簦?span>halogen lamp）、汞燈（mercury vapor arc-discharge lamp）、氙燈（xenon short arc plasma lamp）和發(fā)光二極管（light-emitting diodes，LED）等類型。如圖1，其中，鹵素?zé)舻倪B續(xù)光譜主要分布在可見光的暖色區(qū)，是傳統(tǒng)生物顯微鏡的主要照明光源。鹵素?zé)羰褂脮r，必須配備藍(lán)色濾光片矯正光色。汞燈為非連續(xù)光譜，主要發(fā)射光譜分布在紫光和綠光附近，波長較短，能量高，一般用于熒光顯微鏡的激發(fā)照明。氙燈與汞燈相比，雖然紅外部分占比較高，但可見光區(qū)的連續(xù)性較好，對需要多色熒光激發(fā)的實(shí)驗(yàn)更適合。LED光源也非連續(xù)光譜，但在多個光色范圍內(nèi)都有發(fā)射光譜分布，并具有發(fā)熱少、壽命長等優(yōu)勢，故可應(yīng)用于多種類型光學(xué)顯微鏡的照明。在明場顯微鏡中，LED光源的長壽命和低發(fā)熱更顯優(yōu)勢。
