MICRO-LED120 熒光成像LED光源
MICRO-LED120 熒光成像LED光源
利用熒光分子標記細胞樣品中某些特定結構或成分，用波長較短的光激發(fā)這些熒光分子使其處于高能態(tài)，再對其退激過程中所發(fā)射的波長相對較長的熒光進行顯微成像，即為熒光顯微術。采用該技術，不僅可以克服普通光學顯微術難以直接對無色透明的細胞樣品進行成像的缺點，更重要的是還能通過標記細胞中特定的結構或者分子、離子實現(xiàn)“功能成像”。由于離焦干擾等原因，普通寬場熒光顯微術分辨率并不高，但利用一些特殊技術可以顯著提高分辨率和對比度。
LED120是熒光成像應用的緊湊、易用型白色 LED 光源。通過直接耦合，憑借寬的熒光激發(fā)光譜，可提供**的 LED 照明表現(xiàn)和針對樣本的均勻照明區(qū)域，可采用手動和 TTL 三種方式控制，針對任何儀器配置都能提供便利的控制選項，從基本操作到全自動操作。LED 保固使用壽命長達 20,000 小時，無需更換燈泡或光導管組件，幾乎不需要任何維護，而且采用緊湊型設計，所需的放置空間極小。
LED熒光光源在熒光成像系統(tǒng)中因其小巧、長壽命、低熱量輸出和對生物細胞較低的光毒性而受到青睞。與汞弧燈相比，LED不僅減少了對環(huán)境的影響（無汞），而且降低了細胞的光毒性和光漂白效應，有利于長期細胞成像。此外，LED光源能夠快速開關，保證了每次曝光時光劑量的可重復性，對于定量分析至關重要。
功能和優(yōu)勢
功能 | 益處 |
LED 技術 | 高效、穩(wěn)定、即時開/關、使用壽命長 |
白光激發(fā) | DAPI、CFP、GFP/FITC、YFP、mCherry/Texas Red 和 Cy5 等常用熒光激發(fā) |
直接耦合 | 高功率激發(fā) |
多種控制方式 | 操作簡單 |
占用空間小 | 最小的空間要求；使用較少的臺頂面積 |
經(jīng)過優(yōu)化的熱管理 | 實現(xiàn)**的 LED 輸出、壽命、穩(wěn)定性和可靠性 |
耦合光學元件 | 采用**性能的耦合光學元件，可提供高效的光學輸出和均勻度 |
產(chǎn)品特點
1.更高亮度的LED光源：新品采用了更高亮度的LED光源，能夠在保證光譜范圍小的同時，提供更強的熒光激發(fā)能力。這使得熒光圖像更加明亮、清晰，便于科研工作者捕捉和觀察樣本的細微變化。
2.更精確的電動控制：通過優(yōu)化電動控制系統(tǒng)，新品實現(xiàn)了更加精確的熒光通道切換和亮度調節(jié)。用戶可以輕松地在明場和熒光觀察方式之間切換，同時根據(jù)不同實驗需求調節(jié)亮度，以獲得**的圖像效果。
3.更多樣化的濾光片選擇：為了滿足不同熒光染料的觀察需求，新品提供了更多樣化的濾光片選擇。用戶可以根據(jù)實驗需求選擇合適的濾光片組合，以獲得更加準確的熒光圖像。
4.更人性化的操作界面：新品升級了7英寸觸控液晶屏控制界面，使得用戶操作更加便捷、直觀。用戶可以通過簡單的觸摸操作實現(xiàn)通道切換、亮度調節(jié)等功能，大大提高了工作效率。
5.更穩(wěn)定的外置電源箱：為了確保電源的穩(wěn)定性和安全性，新品采用了更加穩(wěn)定的外置電源箱設計。這不僅保證了光源的穩(wěn)定輸出，還減少了顯微鏡上的空間占用，使得用戶更加方便地操作和調整。
技術規(guī)格
波長范圍 | 370-700nm |
波長范圍 | 370-700nm |
電源 | 通用輸入 100-240VAC, 50/60Hz |
功耗 | 150W |
LED 開/關響應時間 | 85µs TTL；1ms USB |
控制方式 | ON/OFF – TTL 兼容 |
speedDIAL | |
RS-232 指令（SDK 可用 | |
USB | |
尺寸 – 燈頭 | 100 mm x 135 mm x 110 mm (B x H x T) |
尺寸 – 控制器 | 180 mm x 110 mm x 230 mm (B x H x T) |
重量 | 3,4 kg (7.5 lb) |
認證 | RoHS, CE |
質保 | LED – 20,000 小時； |
熒光團
熒光團 | 熒光團波長 (nm) |
DAPI | 385nm |
CFP | 435nm |
GFP/FITC | 470nm |
YFP | 510nm |
TRITC/Cy3/RFP/mCherry | 560nm |
MitoTracker® Red CMXROS | 580nm |
Cy5 | 640nm |
濾光片推薦
Fluorophor | Semrock濾光片 | Chroma濾光片 |
DAPI | DAPI 5060-C | 49028 |
CFP | CFP-2432C | 49001 |
CFP/YFP FRET | FRET CFP/YFP-C | 89002 |
FITC | FITC-5050-A | 49002 |
GFP | GFP-4050B | mCherry |
mCherry-B | 49008 | Cy5 |
Cy5-4040C | 49006 |
熒光顯微術（僅供學習）
1.共聚焦激光掃描顯微術
共聚焦激光掃描顯微術（Confocal Laser Scanning Microscopy, CLSM）的基本原理是利用一對共軛針孔進行“空間濾波”，將焦平面以外的雜散光濾除以提高縱向分辨率，實現(xiàn)非侵入式的“光學切片”。CLSM的橫向分辨率約為100-200 nm，縱向分辨率可達500 nm，大大優(yōu)于普通非共焦方式的熒光顯微術；同時共焦針孔的應用也極大地提高了圖像信噪比。這些優(yōu)點使CLSM被廣泛應用于細胞生物學的研究，尤其是亞細胞層次空間結構和功能的研究。
然而CLSM采用的是逐點掃描的成像方式，成像速度受到限制。近年來發(fā)展起來的轉盤式共聚焦顯微術（Spinning Disk Confocal Microscopy, SDCM）仍利用CLSM的共焦針孔原理，但由于采用高速旋轉的轉盤實現(xiàn)了非常多焦點的近似面照明，所得熒光可以采用CCD采集，在保持圖像質量達到傳統(tǒng)CLSM水平的同時成像速度可達視頻要求，成為活細胞內單分子熒光成像的有力工具。
共聚焦激光顯微術（左）和轉盤式共聚焦顯微術（右）原理示意圖
2.全內反射熒光顯微術
當一束光從光密介質射向光疏介質時，并且入射角大于臨界角時，將發(fā)生全內反射（Total Internal Reflection, TIR）。由于光的波動效應，此時仍會有少量光能量穿透界面并沿著平行界面的方向傳播，稱為隱失波（Evanescent Wave）全內反射熒光顯微術（TIR Fluorescence Microscopy, TIRFM）就是利用這種隱失波來激發(fā)樣品熒光的，由于其穿透深度一般只有100-200 nm，因而縱向分辨率和圖像信噪比均大大提高。常見的TIRFM有棱鏡型和物鏡型兩類。TIRFM一般應用于研究細胞膜或膜內附近區(qū)域的動態(tài)過程，如信號轉導等。
棱鏡型（左）和物鏡型（右）全內反射熒光顯微術示意圖
電光源顯微鏡的照明光源，主要有鹵素燈（halogen lamp）、汞燈（mercury vapor arc-discharge lamp）、氙燈（xenon short arc plasma lamp）和發(fā)光二極管（light-emitting diodes，LED）等類型。如圖1，其中，鹵素燈的連續(xù)光譜主要分布在可見光的暖色區(qū)，是傳統(tǒng)生物顯微鏡的主要照明光源。鹵素燈使用時，必須配備藍色濾光片矯正光色。汞燈為非連續(xù)光譜，主要發(fā)射光譜分布在紫光和綠光附近，波長較短，能量高，一般用于熒光顯微鏡的激發(fā)照明。氙燈與汞燈相比，雖然紅外部分占比較高，但可見光區(qū)的連續(xù)性較好，對需要多色熒光激發(fā)的實驗更適合。LED光源也非連續(xù)光譜，但在多個光色范圍內都有發(fā)射光譜分布，并具有發(fā)熱少、壽命長等優(yōu)勢，故可應用于多種類型光學顯微鏡的照明。在明場顯微鏡中，LED光源的長壽命和低發(fā)熱更顯優(yōu)勢。
