創(chuàng)新性的大視野
隨著研究趨勢向大規(guī)模系統(tǒng)級方法發(fā)展,對更快數(shù)據(jù)采集和更高吞吐量能力的需求不斷增加。大靶面相機傳感器的開發(fā)和PC數(shù)據(jù)處理能力的提高促進了這種研究趨勢。Ti2具有25mm視野,提供了更高水平的可擴展性,使研究人員能夠真正大靶面探測器的實用性,并在攝像頭技術(shù)繼續(xù)快速發(fā)展的同時,為其核心成像平臺提供面向未來的能力。
在大視野里提供明亮的照明
高功率LED可在Ti2的大視野范圍內(nèi)提供明亮的照明,確保從高放大倍率DIC等要求苛刻的應用中獲得清晰、一致的結(jié)果。加入復眼透鏡的設(shè)計提供了從到邊緣的均勻照明,用于定量高速成像和拼大圖應用中圖像的無縫拼接。
專為大視野成像而設(shè)計的緊湊型落射熒光照明器,配備了石英復眼透鏡,可在包括紫外線在內(nèi)的廣譜范圍內(nèi)提供高透射率。具有硬涂層的大直徑熒光濾光片可提供具有高信噪比的大視野圖像。
大直徑觀察光學系統(tǒng)
觀察光路的直徑已經(jīng)擴大,以便在成像端口處實現(xiàn)25的視場數(shù)。由此產(chǎn)生的大視野能夠捕獲傳統(tǒng)光學器件大約兩倍的面積,使用戶能夠從大型傳感器(如CMOS探測器)中獲得更大性能。
大視野成像的物鏡
具有出色圖像平整度的物鏡可確保從到邊緣的高質(zhì)量圖像。利用OFN25物鏡的潛力可顯著加速數(shù)據(jù)收集。
用于大容量數(shù)據(jù)采集的相機
尼康FX格式F接口相機Digital Sight 50M和Digital Sight 10配備了最初為D-SLR專業(yè)相機開發(fā)的,特為研究而優(yōu)化的CMOS圖像傳感器??蓪崿F(xiàn)高速、高靈敏度的活細胞成像和Ti2大視野的有效利用。
出色的尼康光學系統(tǒng)
尼康的高精度CFI60無限遠光學器件,針對各種復雜的觀察方法而設(shè)計,因其出色的光學性能和堅固的可靠性而受到研究人員的高度評價。
切趾相差
尼康的切趾相差物鏡和可選擇的幅度濾光片可顯著提高對比度并減少光暈偽影,從而提供詳細的高清圖像。
切趾相差板被納入APC目標 | 用CFI S Plan Fluor ELWD ADM 40XC物鏡拍攝BSC-1細胞 |
外部相差
電動外部相差系統(tǒng)使用戶能夠通過繞過使用相差物鏡的需要,將相差與落射熒光成像相結(jié)合,而不會影響熒光透射。例如,非常高數(shù)值孔徑的液浸物鏡可用于相差成像。使用這種外部相差系統(tǒng),用戶可以輕松地將相差與其他成像模式相結(jié)合,包括如TIRF和激光光鑷應用的弱熒光成像。
內(nèi)置相差環(huán)的目鏡底座 相差環(huán) 沒有相差環(huán)的物鏡 | 用CFI Apochromat TIRF 100XC Oil物鏡拍攝用GFP-α-微管蛋白標記的PTK-1細胞。 圖像來源:Wadsworth中心的Alexey Khodjakov博士研究科學家VI和教授 |
DIC (微分干涉相差)
尼康備受推崇的DIC光學元件可在整個放大倍率范圍內(nèi)提供均勻清晰細致的圖像,并具有高分辨力和對比度。DIC棱鏡針對每個物鏡單獨定制,為每個樣品提供高質(zhì)量的DIC圖像。
與物鏡相匹配的DIC棱鏡安裝在物鏡轉(zhuǎn)盤中 | DIC和落射熒光圖像: 用CFI Plan Apochromat Lambda 60XC物鏡和DS-Qi2相機拍攝的25mm視野的神經(jīng)元圖像(DAPI、Alexa Fluor® 488、羅丹明-鬼筆環(huán)肽) 圖像來源:西北大學尼康成像中心的Josh Rappoport。 樣品來源: 西北大學的S. Kemal、B. Wang和R. Vassar。 |
NAMC(尼康調(diào)制反差)
這是一種塑料兼容的高對比度成像技術(shù),適用于諸如卵母細胞的未染色的透明樣品。NAMC提供具有陰影投射外觀的偽三維圖像。用戶可以容易地為每個樣品調(diào)整對比度的方向。
NAMC物鏡包含可旋轉(zhuǎn)調(diào)制器 | NAMC圖像: 用CFI S Plan Fluor ELWD NAMC 20XC物鏡拍攝的小鼠胚胎 |
自動校正環(huán)
樣品厚度、蓋玻璃厚度、樣品中的折射率分布和溫度的變化可導致球差和圖像扭曲。高質(zhì)量的物鏡通常配備校正環(huán)以補償這些變化。并且校正環(huán)的精確調(diào)節(jié)對于實現(xiàn)高分辨力、高對比度圖像是至關(guān)重要的。這款新型自動校正環(huán)采用諧波驅(qū)動和自動校正算法,使用戶可以輕松實現(xiàn)精確的校正環(huán)調(diào)整,以每次都能實現(xiàn)物鏡的合適性能。
諧波驅(qū)動機構(gòu),用于校正環(huán)運動的高精度控制 | 超分辨率圖像(DNA PAINT): 用CFI Apochromat TIRF 100XC Oil物鏡拍攝表達α-微管蛋白(綠色)和TOMM-20(品紅色)的CV-1細胞。 |
落射熒光
Lambda系列物鏡采用尼康的納米結(jié)晶涂層技術(shù),非常適合要求高、低信號、多通道熒光成像,需要在寬波長范圍內(nèi)進行高透射和像差校正。結(jié)合提供改進熒光檢測和雜散光對策(如噪聲終結(jié)器)的新型熒光過濾立方體,Lambda系列物鏡證明了它們在弱信號觀測(如單分子成像)甚至基于發(fā)光的應用中的能力。
發(fā)光圖像: HeLa細胞表達基于BRET的鈣指示劑蛋白Nano-lantern(Ca2 +)。 樣品來源:大阪大學科學與工業(yè)研究所長Takeharu Nagai教授。 |
Volume Contrast
Volume Contrast利用一系列在不同Z軸深度捕獲的無標記明場圖像來重構(gòu)相位分布圖像。
Volume Contrast圖像便于細胞的識別,為自動計數(shù)和面積分析提供方便。由于該方法利用了明場成像,因此VC能夠?qū)毎M行實時無損的分析,適用于各種應用。(僅適用于TI2-E)。
使用CFI S Plan Fluor ELWD 20XC成像的HeLa細胞 |
Volume Contrast特征
從無標記樣品中準確識別細胞,用于自動細胞計數(shù)和面積測量。
消除半月效應對細胞鑒定的影響
由于半月效應,相差圖像在培養(yǎng)孔邊緣受到不良影響。VC避免了這一影響,使培養(yǎng)孔邊緣的細胞能夠被清晰地識別,從而增加了細胞計數(shù)精度并改進了統(tǒng)計數(shù)據(jù)。
對焦
即使是成像環(huán)境中溫度和振動的最輕微變化也會極大地影響對焦穩(wěn)定性。Ti2使用靜態(tài)和動態(tài)測量消除了焦點漂移,以便在長時間的實驗中實現(xiàn)納米級和微觀世界的忠實可視化。
為實現(xiàn)高穩(wěn)定性(Ti2-E)而重新進行的機械設(shè)計
為了提高對焦穩(wěn)定性,Z軸驅(qū)動和PFS自動對焦機構(gòu)都經(jīng)過了全面的重新設(shè)計。
新的Z軸調(diào)焦機構(gòu)較小,位于物鏡轉(zhuǎn)盤附近,可更大限度地減少振動。即使采用擴展(雙層光路)配置,它仍然保留在物鏡轉(zhuǎn)盤附近,確保所有應用的穩(wěn)定性。
① 使在擴展配置中,高穩(wěn)定性Z軸調(diào)焦機構(gòu)仍保持與物鏡轉(zhuǎn)盤相鄰 |
聚焦系統(tǒng)(PFS)的探測器部分已從物鏡轉(zhuǎn)盤上拆下,以減少物鏡轉(zhuǎn)盤上的機械負載。這種新設(shè)計還可以更大限度地減少熱傳遞,從而有助于實現(xiàn)更穩(wěn)定的成像環(huán)境。為此,Z軸驅(qū)動電機的功耗也降低了。這些機械重新設(shè)計相結(jié)合,形成了穩(wěn)定的成像平臺,非常適合單分子成像和超分辨率應用。
即使在擴展配置中,高穩(wěn)定性Z軸調(diào)焦機構(gòu)仍保持與物鏡轉(zhuǎn)換器相鄰。 ① PFS物鏡轉(zhuǎn)換器 ② PFS測量單元 |
使用PFS進行實時焦點校正:簡單 出色
對焦系統(tǒng)(PFS)可自動校正由溫度變化和機械振動引起的焦點漂移,這可能是由多種因素引起的,包括向樣品中添加試劑和多位置成像。
PFS通過實時檢測和跟蹤蓋玻片表面的位置來保持焦點。出色的光學偏移技術(shù)使用戶可以輕松地將焦點保持在偏離蓋玻片表面的所需位置。PFS通過內(nèi)置線性編碼器和高速反饋機制自動連續(xù)保持對焦,即使在長期復雜的成像任務(wù)中也能提供高度可靠的圖像。
PFS兼容廣泛的應用,從涉及塑料培養(yǎng)皿的常規(guī)實驗到單分子成像和多光子成像。它還兼容從紫外到紅外的各種波長,這意味著它可用于多光子和光鑷應用。
物鏡自動補水裝置
使用新的物鏡自動補水裝置可以提高使用PFS和水鏡的長期成像性能。物鏡自動補水裝置自動將適量純水施加于物鏡的頂部,防止實驗過程中浸水變干和溢出。它與所有類型的水鏡兼容,有助于在長時間內(nèi)穩(wěn)定地提供高分辨率、高對比度和像差校正的延時圖像。
Compatible objectives
CFI Apochromat LWD Lambda S 20XC WI
CFI Apochromat Lambda S 40XC WI
CFI Apochromat LWD Lambda S 40XC WI
CFI Plan Apochromat VC 60XC WI
CFI Plan Apochromat IR 60XC WI
CFI SR Plan Apochromat IR 60XC WI
CFI SR Plan Apochromat IR 60XAC WI
精度高,質(zhì)量好DIC (微分干涉相差)輔助向?qū)?/span>
不再需要用戶記憶復雜的顯微鏡對準和操作程序。Ti2集成了來自傳感器的數(shù)據(jù),可指導您完成這些步驟,減少用戶的操作錯誤,并使研究人員能夠?qū)W⒂谒麄兊臄?shù)據(jù)。
連續(xù)顯示 顯微鏡狀態(tài)
一系列內(nèi)置傳感器可檢測和傳遞顯微鏡中各種組件的狀態(tài)信息。使用計算機獲取圖像時,所有狀態(tài)信息都記錄在元數(shù)據(jù)中,因此您可以輕松調(diào)用采集條件和/或檢查配置錯誤。
此外,內(nèi)置的相機允許用戶查看后焦平面,便于校準相差環(huán)和DIC的消光十字。它還為TIRF等應用提供了激光安全對準方法。
顯微鏡狀態(tài)可在平板中查看,也可通過顯微鏡前面的指示燈顯示,可在暗房中輕松確認設(shè)備狀態(tài)。
操作步驟向?qū)?/span>
Ti2的輔助向?qū)Чδ転轱@微鏡操作提供了交互式逐步指導??梢栽谄桨咫娔X或PC上查看輔助指南,并集成來自內(nèi)置傳感器和內(nèi)置攝像頭的實時數(shù)據(jù)。輔助向?qū)е荚趲椭脩敉瓿蓪嶒炘O(shè)置和故障排除的校準程序。
①將視場光闌圖像移到視場 ②從光路上取下Bertrand透鏡 ③選擇觀察口 |
自動檢測錯誤 Ti2-E/A
檢查模式支持用戶在平板電腦或PC上輕松確認所有正確的顯微鏡組件是否適合他們選擇的觀察方法。當未實現(xiàn)所需的觀察方法時,此功能消除了通常故障排除所需的時間和精力。當涉及多個用戶時,該功能特別有利,因為每個用戶都有可能對顯微鏡設(shè)置進行意外的改變。自定義檢查程序也可以預先編程。
直觀的操作
Ti2經(jīng)過全面的重新設(shè)計,從整體設(shè)計到每個按鈕和開關(guān)的選擇和放置,為用戶帶來體驗。即使在黑暗中,控制也很容易使用,在黑暗中進行大多數(shù)成像實驗。Ti2提供直觀、輕松的用戶界面,因此研究人員可以專注于數(shù)據(jù),而不是顯微鏡控制。
精心設(shè)計的顯微鏡控制布局
所有按鈕和開關(guān)的位置都基于它們控制的照明類型??刂仆干溆^察的按鈕位于顯微鏡的左側(cè),控制落射熒光觀察的按鈕位于右側(cè)??刂瞥R姴僮鞯陌粹o位于前面板上。這種分區(qū)的使用提供了易于記憶的布局,這是在暗室中操作顯微鏡時的理想特征。
① 往復式切換 (Ti2-E)
設(shè)計中融入了往復式切換,用于控制熒光濾光片轉(zhuǎn)盤和物鏡轉(zhuǎn)盤等設(shè)備。這些類型的開關(guān)模仿手動旋轉(zhuǎn)這些設(shè)備的感覺,以實現(xiàn)直觀的控制??梢詫⒏郊庸δ芙Y(jié)合到這些往復式切換中,使得單個開關(guān)可以操作多個相關(guān)設(shè)備。例如,用于熒光濾光片轉(zhuǎn)盤的往復式切換不僅旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)盤,而且當用戶按下開關(guān)時也打開和關(guān)閉熒光快門。還可以對這些開關(guān)進行編程以操作發(fā)射濾光片轉(zhuǎn)盤和外部相差單元。
② 編程功能按鈕 (Ti2-E/A)
位置便利的功能按鈕支持自定義用戶界面。用戶可以從100多種功能中進行選擇,包括控制快門等電動設(shè)備,甚至通過I/O端口向外部設(shè)備輸出信號,以進行觸發(fā)采集。通過存儲每個電動設(shè)備的設(shè)置,能夠即時改變觀察方法的模式功能也可以分配給這些按鈕。
③ 調(diào)焦旋鈕 (Ti2-E)
調(diào)焦加速按鈕和PFS接合按鈕設(shè)置在調(diào)焦旋鈕附近。由于它們的不同形狀,這兩個按鈕很容易通過觸摸識別。調(diào)焦速度根據(jù)使用物鏡自動調(diào)整,通過保持理想的調(diào)焦速度實現(xiàn)無壓力操作
使用操縱桿和平板電腦進行直觀控制
Ti2操縱桿不僅控制載物臺的移動,還控制顯微鏡的大部分電動功能,包括PFS活動。它可以顯示XYZ坐標和顯微鏡組件的狀態(tài),為用戶遠程控制顯微鏡提供了一種有效的手段。Ti2的電動功能也可以通過平板電腦控制,通過無線局域網(wǎng)連接到顯微鏡,為顯微鏡控制提供了一個通用的圖形界面。