人羥基膠原吡啶交聯(lián)(OH-PYD)elisa試劑盒試驗(yàn)所需自備物品:

1.  酶標(biāo)儀(450nm波長(zhǎng)濾光片)

2.  高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10μl, 2-20μl, 20-200μl, 200-1000μl

3.  37℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水

4.  吸水紙

檢測(cè)前準(zhǔn)備工作:

1. 請(qǐng)?zhí)崆?/span>20分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫。

2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶，屬于正常現(xiàn)象，可用40℃水浴微加熱使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。(加熱溫度不要超過(guò)50℃)使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。

3.  標(biāo)準(zhǔn)品: 加入標(biāo)準(zhǔn)品&標(biāo)本稀釋液1.0ml至凍干標(biāo)準(zhǔn)品中，靜置10分鐘，待其充分溶解后，輕輕混勻(濃度為5000 pg/ml)。然后根據(jù)需要進(jìn)行倍比稀釋(注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)。建議配制成以下濃度： 2500、1250、625、312.5、156.2、78.1、39.05、0 pg/ml。樣品稀釋液直接作為空白孔 0 pg/ml。如配制2500pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品：取0.5ml (不要少于0.5ml )5000pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的EP管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

4. *化抗體工作液：實(shí)驗(yàn)前計(jì)算當(dāng)次實(shí)驗(yàn)所需用量(以100μl/孔計(jì))，實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制100-200μl。使用前15分鐘，以*化抗體稀釋液稀釋濃縮*化抗體(1:100)成工作濃度。當(dāng)日使用。

5. 酶結(jié)合物工作液：實(shí)驗(yàn)前計(jì)算當(dāng)次實(shí)驗(yàn)所需用量(以100μl/孔計(jì))，實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制  100-200μl。使用前15分鐘，以*化抗體稀釋液稀釋濃縮*化抗體(1:100)成工作濃度。當(dāng)日使用。

人羥基膠原吡啶交聯(lián)(OH-PYD)elisa試劑盒使用建議

1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2． 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3． 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，*使用排槍加樣。

4． 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值)，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6． 底物請(qǐng)避光保存。

7． 嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9． 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

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