【儀表網(wǎng) 行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)】上海市凈水技術(shù)學(xué)會(huì)發(fā)布了團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《水中微生物含量的測(cè)定 三磷酸腺苷(ATP)生物發(fā)光法》征求意見稿，現(xiàn)予征求意見。意見反饋郵箱：50706127@qq.com。
 

　　為貫徹《關(guān)于加強(qiáng)城市供水安全保障工作的通知》(建辦城〔2022〕41 號(hào))，提高供水突發(fā)污染應(yīng)對(duì)能力，加強(qiáng)水廠精細(xì)化管理，保障供水生物安全，規(guī)范水中微生物三磷酸腺苷(ATP)的測(cè)定，為《上海市城市總體規(guī)劃(2017-2035 年)報(bào)告》中“全市供水水質(zhì)達(dá)到國(guó)際先進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)，滿足直飲需求”提供技術(shù)支撐，編制組經(jīng)廣泛調(diào)查研究，并在充分征求意見的基礎(chǔ)上，制定本標(biāo)準(zhǔn)。
 

　　本標(biāo)準(zhǔn)參照 GB/T 1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第 1 部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。
 

　　本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：上海浦東水務(wù)(集團(tuán))有限公司、東方國(guó)際集團(tuán)上海環(huán)境科技有限公司、上海南匯自來水有限公司、哈希水質(zhì)分析儀器(上海)有限公司、同濟(jì)大學(xué)、天津泰達(dá)水業(yè)有限公司、上海青浦自來水有限公司、上海市松江自來水有限公司、上海市自來水奉賢有限公司、沈陽水務(wù)水質(zhì)檢測(cè)技術(shù)發(fā)展有限公司、衡陽市清源水質(zhì)檢測(cè)有限公司、廈門理工學(xué)院、廈門市水資源利用與保護(hù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、昆山市自來水集團(tuán)有限公司。
 

　　本標(biāo)準(zhǔn)中的“微生物”是指具有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的微生物，如細(xì)菌、真菌、藻類和原生動(dòng)物等。本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測(cè)定水中微生物三磷酸腺苷(ATP)的生物發(fā)光法。
 

　　本標(biāo)準(zhǔn)適用于以水為基質(zhì)的樣品，包括地表水、水源水、工藝過程水、生活飲用水、直飲水和瓶裝水等。
 

　　當(dāng)制備試樣的樣品體積為50mL 時(shí)，方法檢出限為0.17pg/mL，測(cè)定下限為0.68pg/mL。本標(biāo)準(zhǔn)不適用于溶解性總固體>10000mg/L 的水樣，也不適用于含高濃度有機(jī)物、重金屬等干擾物質(zhì)的水樣。
 

　　方法原理：
 

　　ATP 是高等植物細(xì)胞、高等動(dòng)物細(xì)胞和微生物細(xì)胞的主要組成部分，通過測(cè)定活性細(xì)胞內(nèi)的 ATP 濃度，可以快速反映水中活性微生物的含量。測(cè)定過程中，ATP 和熒光素、熒光素酶等快速反應(yīng)產(chǎn)生光，經(jīng)由 ATP 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)校準(zhǔn)的光度計(jì)測(cè)定 RLU，根據(jù)公式計(jì)算最終得到 ATP 濃度。
 

　　儀器和設(shè)備：
 

　　不應(yīng)將一次性耗材經(jīng)高壓滅菌后重復(fù)使用，不應(yīng)使用含有熒光物質(zhì)的記號(hào)筆。
 

　　1.光度計(jì)：使用光電倍增管，波長(zhǎng)范圍至少覆蓋530±20nm，測(cè)量結(jié)果為 RLU。
 

　　2.微量移液器：固定式100μL 和1000μL，可調(diào)式100～1000μL。
 

　　3.高壓蒸汽滅菌器：121 ℃可調(diào)，用于實(shí)驗(yàn)用水等的滅菌。
 

　　4.干熱滅菌器：160 ℃～180 ℃可調(diào)，用于玻璃采樣容器和無菌瓶等的滅菌。
 

　　5.采樣容器：帶螺旋蓋的無菌瓶或無菌袋，容積>100mL，玻璃、PP和 HDPE 等材質(zhì)。
 

　　6.注射器：容積刻度≥50mL，具活塞，無針頭，魯爾接口，PP 材質(zhì)，無菌獨(dú)立包裝，一次性使用。
 

　　7.測(cè)光管：尺寸和光度計(jì)(6.1)適配，PP 材質(zhì)，無菌包裝，一次性使用。
 

　　8.測(cè)光管架：尺寸和測(cè)光管(6.7)適配。
 

　　9.微量移液器吸頭：200 μL 和 1000 μL，與微量移液器(6.2)適配，PP 材質(zhì)，必須為無菌原盒包裝，一次性使用。
 

　　10.針頭過濾器：濾盤直徑≤35 mm，孔徑 0.45 μm，魯爾接口與注射器(6.6)適配，水系混合纖維素酯(MCE)、玻璃纖維等材質(zhì)，無菌包裝，一次性使用。
 

　　11.實(shí)驗(yàn)室常用儀器、設(shè)備和器材。
 

　　實(shí)驗(yàn)環(huán)境：
 

　　操作人員應(yīng)佩戴個(gè)人防護(hù)用品(7.1～7.3)，對(duì)實(shí)驗(yàn)桌面和儀器進(jìn)行表面消毒(7.4)，減少環(huán)境對(duì)實(shí)驗(yàn)全過程的污染。無菌室不是必須的。
 

　　質(zhì)量保證和質(zhì)量控制：
 

　　1.空白實(shí)驗(yàn)
 

　　每批(或20個(gè))樣品應(yīng)對(duì)1個(gè)空白試樣(9.4)進(jìn)行全程序空白實(shí)驗(yàn)，測(cè)定結(jié)果應(yīng)<方法檢出限。
 

　　2.單點(diǎn)校準(zhǔn)
 

　　完成當(dāng)日所有試樣測(cè)定后，宜進(jìn)行一次單點(diǎn)校準(zhǔn)，評(píng)估當(dāng)日測(cè)定數(shù)據(jù)的有效性。
 

　　詳情請(qǐng)見附件。