【儀表網(wǎng) 行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)】由中國(guó)材料與試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)科學(xué)試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化領(lǐng)域委員會(huì)科學(xué)試驗(yàn)裝置標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)(CSTM/FC98/TCO3)歸口承擔(dān)的《水質(zhì)急性毒性現(xiàn)場(chǎng)快速監(jiān)測(cè)發(fā)光細(xì)菌法》團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)(立項(xiàng)號(hào):CSTM LX 980301433—2024)已完成征求意見(jiàn)稿，按照《中關(guān)村材料試驗(yàn)技術(shù)聯(lián)盟團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)管理辦法》的有關(guān)規(guī)定，現(xiàn)公開廣泛征求意見(jiàn)。
 

　　本文件參照GB/T 1.1—2020 《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》和GB/T 20001.4—2015《標(biāo)準(zhǔn)編寫規(guī)則 第 4 部分：試驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)》的規(guī)定起草。
 

　　本文件規(guī)定了測(cè)定水質(zhì)急性毒性現(xiàn)場(chǎng)快速監(jiān)測(cè)的發(fā)光細(xì)菌法。本文件適用于地表水、地下水、工業(yè)廢水和生活污水中發(fā)光細(xì)菌法急性毒性的現(xiàn)場(chǎng)快速監(jiān)測(cè)。
 

　　原理：
 

　　樣品中受試物質(zhì)與發(fā)光細(xì)菌接觸一定的時(shí)間后，可影響或干擾細(xì)菌的新陳代謝，使細(xì)菌的發(fā)光強(qiáng)度下降，受試物質(zhì)對(duì)發(fā)光強(qiáng)度的抑制程度與其毒性及濃度有對(duì)應(yīng)關(guān)系，發(fā)光強(qiáng)度的變化可以用毒性測(cè)定儀檢測(cè)，根據(jù)加入樣品中的發(fā)光細(xì)菌發(fā)光強(qiáng)度與對(duì)照發(fā)光強(qiáng)度的比值計(jì)算樣品的發(fā)光抑制率，用發(fā)光抑制率表征急性毒性。
 

　　干擾和消除：
 

　　1.渾濁溶液會(huì)導(dǎo)致測(cè)試結(jié)果偏高，應(yīng)通過(guò)離心或者過(guò)濾去除干擾，渾濁度大于100NTU 的樣品應(yīng)靜置沉淀1小時(shí)后待測(cè)。
 

　　2.pH 值過(guò)高或過(guò)低都會(huì)降低發(fā)光細(xì)菌的活性，待測(cè)樣品的 pH值應(yīng)在6.0~9.0。若須測(cè)定排除 pH值影響的急性毒性，參照8.2調(diào)節(jié)。
 

　　3.經(jīng)加氯消毒處理的生活污水，加入最終濃度為0.8mg/L 的硫代硫酸鈉以去除殘余氯。
 

　　4.高鹽度樣品應(yīng)調(diào)節(jié)測(cè)試過(guò)程中氯化鈉的加入量，使待測(cè)樣品不超過(guò)相當(dāng)于30g/L氯化鈉的滲透壓。
 

　　5.本方法不能排除色度影響的干擾。
 

　　儀器設(shè)備：
 

　　1.采樣瓶：聚乙烯、聚四氟乙烯或玻璃瓶，帶聚四氟乙烯襯墊瓶蓋。
 

　　2.毒性測(cè)定儀。具有國(guó)標(biāo)方法測(cè)試模式或 ISO 方法測(cè)試模式，具備 1 個(gè)或多個(gè)測(cè)試管，可測(cè)光譜范圍：300～600 nm，暗計(jì)數(shù)：≤300 個(gè)/s，接觸時(shí)間：15 min，毒性范圍：0～100%(發(fā)光抑制率)，環(huán)境溫度：5～30 ℃。
 

　　3.檢測(cè)管(與毒性測(cè)定儀可配套使用)。
 

　　4.精密移液器：100μL、200μL、1000μL和5000μL。
 

　　5.電子天平：最小分度值為0.1mg。
 

　　6.pH試紙。
 

　　7.100mL量筒。
 

　　8.100mL容量瓶。
 

　　9.1000mL容量瓶。
 

　　10.一般常用儀器和設(shè)備。
 

　　國(guó)標(biāo)方法測(cè)試模式：
 

　　據(jù)不同毒性測(cè)定儀規(guī)格，按照說(shuō)明書設(shè)定儀器，使其適用于國(guó)標(biāo)方法測(cè)試模式。
 

　　a)打開毒性測(cè)定儀電源，靜置，等待儀器預(yù)熱完成。
 

　　b)在檢測(cè)管中加入200μL 氯化鈉溶液(6.3)，再加入 1800 μL 參比水(6.2)或水樣，充分混勻，參比水作為對(duì)照組。
 

　　c)取50μL 菌種懸浮液(6.1)依次加入到步驟 b)的檢測(cè)管中，輕微搖晃后，迅速放置于儀器對(duì)應(yīng)檢測(cè)孔位。
 

　　d)待反應(yīng)15min 后，依次讀取對(duì)照組和水樣檢測(cè)管的發(fā)光強(qiáng)度
 

　　ISO 方法測(cè)試模式：
 

　　根據(jù)不同毒性測(cè)定儀規(guī)格，按照說(shuō)明書設(shè)定儀器，使其適用于 ISO 方法測(cè)試模式。
 

　　a)打開毒性測(cè)定儀電源，靜置，等待儀器預(yù)熱完成。
 

　　b)在檢測(cè)管中加入100μL 氯化鈉溶液(6.3)，再加入900μL 參比水(6.2)或水樣，充分混勻，參比水作為對(duì)照組。
 

　　c)另取一組檢測(cè)管置于儀器中，取100μL 菌種懸浮液(6.1)加入檢測(cè)管中，測(cè)試菌種懸浮液的初始發(fā)光強(qiáng)度。
 

　　d)取 900 μL 步驟 b)調(diào)節(jié)好氯化鈉濃度的對(duì)照組、水樣，加入到步驟 c)的檢測(cè)管中，混合均勻。
 

　　e) 待反應(yīng)15min 后，依次讀取對(duì)照組和水樣檢測(cè)管的發(fā)光強(qiáng)度。
 

　　廢物處置：
 

　　現(xiàn)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生的廢液和廢物應(yīng)集中收集，分類保管，并做好相應(yīng)標(biāo)識(shí)，依法委托有資質(zhì)的單位進(jìn)行處理。
 

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