【儀表網(wǎng) 儀表新品】1958年，D.H.Spackman，W.H.Stein和S.Moore發(fā)明了離子交換分離、茚三酮柱后衍生氨基酸技術(shù)，使得氨基酸分析選擇性高、分析速度快、準確度高。而且成功實現(xiàn)了自動化，是研究的重要里程碑。自此，氨基酸分析儀被廣泛應(yīng)用到飼料、藥物、食物等的氨基酸及其類似物的分析中。日立從1962年開始潛心研究氨基酸分析儀，并在技術(shù)上取得了巨大的進步。
 

　　產(chǎn)品特點：
 

　　LA8080全自動氨基酸分析儀采用離子交換色譜分離和茚三酮柱后衍生技術(shù)，是分析氨基酸的專用儀，主要有以下三大特點：
 

　　操作簡便
 

　　設(shè)計符合人體工學(xué)，充分考慮到用戶的視野范圍和操作流程。衍生化反應(yīng)前才將兩種溶液進行實時混合，因此茚三酮溶劑無需冷藏。可直接使用市售的緩沖液和衍生溶劑。
 

　　設(shè)計緊湊
 

　　日立采用臺式設(shè)計。占地空間小，主機體積縮小了約30%。前置設(shè)計綜合考慮了多種因素，方便放試劑瓶和樣品，更換色譜柱和密封配件也十分簡便。
 

　　數(shù)據(jù)可靠性高
 

　　秉承了之前型號“L-8900”“L-8800”的優(yōu)異性能，采用離子交換色譜法，基本分析條件和之前型號一樣。茚三酮柱后衍生反應(yīng)的穩(wěn)定性高，因此可在蛋白水解和生理體液分析法中獲得良好的定量分析數(shù)據(jù)。
 

　　應(yīng)用
 

　　圖2所示為通過標(biāo)準分析法來分析蛋白質(zhì)水解液的色譜圖。以0.40mL/min流速輸送檸檬酸鈉緩沖液，使粒徑為3μm的陽離子交換樹脂色譜柱(i.d.4.6mm×60mm)保持57℃。然后，以0.35mL/min流速輸送茚三酮試劑與緩沖液混合，135℃時衍生，在570nm和440nm的波長處測量吸光度。
 

　　分析30分鐘后，各成分分離度達到1.2以上。另外，天門冬氨酸(Asp)的檢出限為2.5 pmol以下(信噪比=2)，峰面積重現(xiàn)性(2 nmol)良好，RSD低于1.0%。
 

圖2蛋白質(zhì)水解分析實例
 

　　在做蛋白質(zhì)成分分析時，一般我們使用鹽酸來水解蛋白，但是半胱氨酸、胱氨酸和蛋氨酸很容易被氧化。因此，目前在分析磺丙氨酸(CySO3H)和蛋氨酸砜(MetSON)時，先用過甲酸氧化，然后再加鹽酸水解。如圖5所示為僅分析CySO3H和MetSON的短程序分析應(yīng)用實例。
 

圖3過甲酸氧化水解和短程序分析實例
 

　　總結(jié)
 

　　Moore等人發(fā)明的氨基酸分析方法能夠一直沿用至今，是因為他們在設(shè)計分離系統(tǒng)和衍生系統(tǒng)時，經(jīng)過反復(fù)斟酌，精心設(shè)計。聚苯乙烯聚合物的離子交換樹脂與氨基酸的相互作用十分巧妙，芳香族的中性氨基酸如苯丙氨酸和酪氨酸，增強了與色譜柱填料聚合物之間的疏水相互作用，從而實現(xiàn)了良好的分離。茚三酮的柱后衍生方法對樣品中的雜質(zhì)有較高的選擇性，用戶只需認真完成去蛋白以及過濾處理，即可獲得高可靠性的分析結(jié)果。
 

　　“前人栽樹，后人乘涼”，我十分驚嘆于前人的智慧并滿懷感激，今后日立會將氨基酸分析技術(shù)進一步發(fā)揚光大。