喹乙醇檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)使用說明書
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測組織、飼料等樣本中的喹乙醇(Olaquindox,OQX),試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標板、酶標記物、抗體、標準品及其他配套試劑組成。檢測時,加入標準品或樣品溶液,樣本中的喹乙醇和酶標板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗喹乙醇抗體,加入酶標記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含喹乙醇含量成負相關(guān),與標準曲線比較即可得出樣本中喹乙醇的殘留量。
elisa檢測試劑盒酶聯(lián)免疫試驗步驟
將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出,置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時可能會有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
實驗開始前,用去離子水將20×濃縮洗滌液按20倍稀釋成工作洗滌液。
編號:將樣本和標準品對應(yīng)微孔按序編號,每個樣本和標準品做2孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
加樣反應(yīng):加標準品或樣本50µl/孔到各自的微孔中,然后加抗體工作液50µl/孔,輕輕振蕩5秒混勻,37℃避光反應(yīng)30分鐘。
洗滌:將孔內(nèi)液體甩干,用工作洗滌液250µl/孔充分洗滌5次,每次間隔30秒,zui后用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
加酶反應(yīng):加酶標記物100µl/孔,37℃避光反應(yīng)30分鐘。
顯色:加底物液A 50µl/孔,再加底物液B 50µl/孔,輕輕振蕩5秒混勻,37℃避光顯色15分鐘。
終止:加終止液50µl/孔,輕輕振蕩混勻,終止反應(yīng)。
測吸光值:用酶標儀于450nm處測定每孔吸光度值(建議用雙波長450/630nm)。測定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。
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