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大鼠elisa檢測(cè)試劑盒原理與方法。

時(shí)間:2020/8/19閱讀:192
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大鼠elisa檢測(cè)試劑盒的原理:
   

     利用Cre/LoxP 和來(lái)自酵母的FLP-frt 系統(tǒng)可以研究特定組織器官或特定細(xì)胞中靶基因滅活所導(dǎo)致

的表型[7]。通過(guò)常規(guī)基因打靶在基因組的靶位點(diǎn)上裝上兩個(gè)同向排列的1oxP,并以此兩側(cè)裝接上

loxP 的(“loxP floxed”)ES 細(xì)胞產(chǎn)生“loxPfloxed”小鼠,然后,通過(guò)將“loxP floxed”小鼠與Cre

轉(zhuǎn)基因鼠雜交(也可以其他方式向小鼠中引入Cre 重組酶),產(chǎn)生靶基因發(fā)生特定方式(如特定的組織特

異性)修飾的條件性突變小鼠。在“loxP floxed”小鼠,雖然靶基因的兩側(cè)已各裝上了一個(gè)loxP,但

靶基因并沒(méi)有發(fā)生其他的變化,故“1oxP noxed”小鼠表型仍同野生型的一樣。但當(dāng)它與Cre 轉(zhuǎn)基

因小鼠雜交時(shí),產(chǎn)生的子代中將同時(shí)帶有“loxP floxed”靶基因和Cre 基因。Cre 基因表達(dá)產(chǎn)生的

Cre 重組酶就會(huì)介導(dǎo)靶基因兩側(cè)的1oxP 間發(fā)生切除反應(yīng),結(jié)果將一個(gè)loxP 和靶基因切除。這樣,靶

基因的修飾(切除)是以Cre 的表達(dá)為前提的。Cre 的表達(dá)特性決定了靶基因的修飾(切除)持性:即Cre

在哪一種組織細(xì)胞中表達(dá),靶基因的修飾(切除)就發(fā)生在哪種組織細(xì)胞;而Cre 的表達(dá)水平將影響靶基

因在此種組織細(xì)胞中進(jìn)行修飾的效率。所以只要控制Cre 的表達(dá)特異性和表達(dá)水平就可實(shí)現(xiàn)對(duì)小鼠中

靶基因修飾的特異性和程度。

    大鼠elisa檢測(cè)試劑盒方法;
   

誘導(dǎo)性基因敲除也是以Cre/loxp 系統(tǒng)為基礎(chǔ),但卻是利用控制Cre 表達(dá)的啟動(dòng)子的活性或所表達(dá)的

Cre 酶活性具有可誘導(dǎo)的特點(diǎn),通過(guò)對(duì)誘導(dǎo)劑給予時(shí)間的控制或利用Cre 基因定位表達(dá)系統(tǒng)中載體的

宿主細(xì)胞特異性和將該表達(dá)系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到動(dòng)物體內(nèi)的過(guò)程在時(shí)間上的可控性,從而在1oxP 動(dòng)物的一定

發(fā)育階段和一定組織細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)對(duì)特定基因進(jìn)行遺傳修飾之目的的基因敲除技術(shù)。人們可以通過(guò)對(duì)誘

導(dǎo)劑給予時(shí)間的預(yù)先設(shè)計(jì)的方式來(lái)對(duì)動(dòng)物基因突變的時(shí)空特異性進(jìn)行人為控制、以避免出現(xiàn)死胎或動(dòng)

物出生后不久即死亡的現(xiàn)象。常見(jiàn)的幾種誘導(dǎo)性類型如下:四環(huán)素誘導(dǎo)型;干擾素誘導(dǎo)型;激素誘導(dǎo)型;

腺病毒介導(dǎo)型。

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