類    似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火（復(fù)性）--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：

1、模板DNA的變性（90℃-95℃）：

模板DNA經(jīng)加熱至90~95℃一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備，雙鏈DNA在高溫作用下，氫鍵斷裂，形成單鏈DNA。

2、模板DNA與引物的退火（復(fù)性）（60℃-65℃）：

模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至50~60℃，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合。溫度降低，引物與DNA模板結(jié)合，形成局部雙鏈。

3、引物的延伸（70℃-75℃）：

DNA模板--引物結(jié)合物在DNA聚合酶的作用下，于70~75℃，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過(guò)程，就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈"，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2～4分鐘，2～3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬(wàn)倍。PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)。在Taq酶的作用下，以dNTP為原料，從引物的3′端開(kāi)始以從5′到3′端的方向延伸，合成與模板互補(bǔ)的DNA鏈。每一循環(huán)經(jīng)過(guò)變性、退火和延伸，DNA含量即增加一倍。