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ELISA試劑盒操作時的浸泡步驟2024/6/3
ELISA試劑盒操作時的浸泡步驟：1、吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液。2、用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去）。3、浸泡，即將洗滌液注滿板孔，放置1-2分鐘，間歇搖動，浸泡時間不可隨意縮短。4、吸干孔...
PCR反應(yīng)中的引物二聚體應(yīng)對方法2024/5/27
PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制，PCR的最大特點，是能將微量的DNA大幅增加。如果反應(yīng)出現(xiàn)了引物二聚體，有許多方法可以減...
實時熒光定量PCR熒光化學(xué)物質(zhì)原理簡述2024/5/20
實時熒光定量PCR所使用的熒光物質(zhì)可分為兩種：熒光探針和熒光染料?，F(xiàn)將其原理簡述如下：1.TaqMan熒光探針：PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標(biāo)...
PCR反應(yīng)引物純化方式淺析2024/5/6
1、脫鹽寡核苷酸合成后，為了純化寡核苷酸成為天然的DNA結(jié)構(gòu)，首先必須去除保護基團。通過濃氨水處理，合成的寡核苷酸從固相載體上分離，2-氰乙氧基--磷酸二脂鍵的保護基團，以及堿基的保護基團基（苯甲?；?..
細胞生長緩慢解析2024/4/28
細胞生長緩慢解析：1、培養(yǎng)基可能缺乏細胞生長所需的某種因子。通常情況下，當(dāng)小伙伴購買細胞，并沒有按照ATCC或國內(nèi)細胞庫的方法制備培養(yǎng)基，使用實驗室兄弟姐妹使用的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。解決方法一般是按照的...
PCR反應(yīng)中主要成份引物解讀2024/4/22
PCR反應(yīng)產(chǎn)物的特異性由一對上下游引物所決定。引物的好壞往往是PCR成敗的關(guān)鍵。引物設(shè)計和選擇目的DNA序列區(qū)域時可遵循下列原則：1、引物長度約為16-30bp，太短會降低退火溫度影響引物與模板配對，...
ELISA試驗溫育過程詳解2024/4/15
在ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后?？乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為溫育，有人稱之為孵育，在ELISA試劑盒中似不恰當(dāng)。溫育常采用的溫度有43...
細胞培養(yǎng)技術(shù)包含的各方面總結(jié)2024/4/8
細胞培養(yǎng)技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)研究中一個基礎(chǔ)且關(guān)鍵的技術(shù)，廣泛應(yīng)用于細胞生物學(xué)、藥理學(xué)、遺傳學(xué)、癌癥研究等領(lǐng)域。一個全面的細胞培養(yǎng)技術(shù)總結(jié)應(yīng)該包含以下幾個方面：1.培養(yǎng)環(huán)境溫度：大部分哺乳動物細胞在37°C下...
移液器操作規(guī)范與技巧2024/3/29
移液器的工作原理是活塞通過彈簧的伸縮運動來實現(xiàn)吸液和放液。在活塞推動下，排出部分空氣，利用大氣壓吸入液體，再由活塞推動空氣排出液體。使用移液器時，配合彈簧的伸縮性特點來操作，可以很好地控制移液的速度和...
支原體污染細胞常用清除方法2024/3/25
支原體污染細胞后，有必要清除支原體，常用方法有：1、對于非重要的細胞，如培養(yǎng)中的細胞、WCB的細胞等，將培養(yǎng)物與用過的培養(yǎng)基滅活后丟棄即可。對于較為重要的細胞，如來源珍貴或?qū)嶒炇抑屑毎２亓枯^小等可以...
細胞培養(yǎng)實驗基本操作步驟2024/3/18
細胞培養(yǎng)實驗基本操作：1、進無菌室前要洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。2、操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意...
PCR產(chǎn)物純化效率提升考慮要素2024/3/11
PCR擴增完成后需要進行瓊脂糖凝膠電泳檢測，在條帶單一無其他雜帶的情況下，可以直接對產(chǎn)物進行純化。提升PCR產(chǎn)物純化效率要點合集如下：1.模板純度，有較多蛋白或其他雜質(zhì)時，會一定程度影響pcr效率；2...
ELISA實驗洗板技術(shù)詳細說明2024/3/4
正確的洗滌和沖洗方案尤其重要。在下游分析過程中，不充分、不一致和/或過度清洗會造成問題。有許多洗板的方法，包括使用自動洗板機、手動分流器或洗瓶。當(dāng)手動吸出孔中的液體時，要注意不要碰到孔的底部--吸管的...
細胞培養(yǎng)具體過程2024/2/26
細胞培養(yǎng)：是指將活細胞（尤其是分散的細胞）在體外進行培養(yǎng)的方法。細胞培養(yǎng)的一般過程:一、準(zhǔn)備工作準(zhǔn)備工作對開展細胞培養(yǎng)異常重要，工作量也較大，應(yīng)給予足夠的重視，推備工作中某一環(huán)節(jié)的疏忽可導(dǎo)致實驗失敗或...
標(biāo)準(zhǔn)溶液自配須具備的基本要求2024/2/18
標(biāo)準(zhǔn)溶液（standardsolution）在滴定分析中常用作滴定劑。在其他的分析方法中用標(biāo)準(zhǔn)溶液繪制工作曲線或作計算標(biāo)準(zhǔn)。標(biāo)準(zhǔn)溶液提取有兩種方法，一種是直接制備對照品，另一種是已知準(zhǔn)確濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液...
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