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商品屬性：

細胞培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

犬雌激素(E)免疫試劑盒*直銷

瓊脂培養(yǎng)基B 英文名稱：Agar medium B (Casein soya bean digest agar) 產(chǎn)品規(guī)格：250g

豬腎素(Renin)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

小鼠酐2(CA-2)免疫試劑盒*直銷

小鼠促有絲分裂因子(MF/MPF)免疫試劑盒*直銷

人真胰島素(TI)免疫試劑盒進口、分裝

人糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)免疫試劑盒進口、分裝

人磷脂酰肌醇抗體IgG(PI IgG)免疫試劑盒進口、分裝

人激動異構(gòu)/細胞分裂素MB(CKMB)免疫試劑盒進口、ows\system32\EhStorShell.dll

大鼠肌源性干細胞Duck Hepatitis B Virus(DHBV)鴨乙型肝炎病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周HMG14/HMGN1  高遷移率核小體結(jié)合蛋白1 規(guī)格: 0.1mlGoat Anti-human IgM/AP  堿性磷酸（AP）標記的羊抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml

Herba taxilli桑寄生LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周MAP-9  微管相關蛋白9抗體 規(guī)格: 0.2mlATXN7L3B  共濟失調(diào)7樣蛋白3B抗體 規(guī)格: 0.2ml

Bovine Herpes Mammillitis Virus(BHMV)牛皰疹炎病毒LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周TACC1  、胃抗原GA55抗體 規(guī)格: 0.2mlATG3  自噬相關蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1ml

Histoplasm spp.組織胞漿通用探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周HIV p55+P6-Gag  艾滋毒抗體 規(guī)格: 0.2mlFAM91A1  FAM91A1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

erwinia carotovora subsp atroseptica胡蘿卜軟腐歐文氏馬鈴薯黑脛亞種PCR試劑盒 植物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Phospho-CDK2 (Thr160)  磷酸化周期素依賴性激2抗體 規(guī)格: 0.1mlMCPIP1  單核細胞趨化誘導蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Fructus psoraleae補骨脂PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周Rabbit Anti-Monkey IgM/HRP  辣根過氧化物標記的兔抗猴IgM 規(guī)格: 0.1mlENPP1  核苷酸內(nèi)焦磷酸/磷酸二酯1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Cache Valley Virus(CVV)卡奇谷病毒RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Integrin alpha 2b/CD41  小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗體 規(guī)格: 0.1mlCA13  碳酸酐 規(guī)格: 0.2ml

Chikungunya Virus(CHIKV)基孔肯尼雅病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Rabbit Anti-mouse IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的兔抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlPhospho-HSP27 (Ser82)  磷酸化熱休克蛋白27抗體 規(guī)格: 0.1ml

Natrii sulfas染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周Calpain 2  鈣激活的中性蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1mlATG18/WIPI1  自噬相關蛋白18抗體 規(guī)格: 0.2ml

Erysipelothrix spp丹毒絲屬通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Mouse Anti-Goat IgG  小鼠抗羊IgG 規(guī)格: 1mgProteasome 20S C2  蛋白體PSMα1抗體 規(guī)格: 0.2ml

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。