當前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>糖代謝系列>> α半乳糖苷酶測試盒50管/24樣
貨號 | BJ-01S9937 |
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產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
可見分光光度法 | 50管/24樣 | BJ-01S9937 |
商品介紹:
測定意義:
α-GAL (EC 3.2.1.22)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,能專一地催化α半乳糖苷鍵的水解,主要參與棉子糖、水蘇糖、蜜二糖和半乳甘露聚糖等半乳糖苷的降解。α-GAL對于植物種子的萌發(fā)至關(guān)重要,種子萌發(fā)初期,其催化產(chǎn)生的D-半乳糖通過糖酵解途徑迅速轉(zhuǎn)化和消耗,為種子的萌發(fā)提供最初的能量來源,后期則主要參與細胞壁儲藏多糖水解。
測定原理:
α-GAL分解對-硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷生成對-硝基,后者在400nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算α-GAL活性。
自備用品:
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
人 WWP1 基因全長ORF克隆
人 CUTC 基因全長ORF克隆
人 C3AR1 基因全長ORF克隆
人 CRMP1 基因全長ORF克隆
人 CAND1 基因全長ORF克隆
人 CUEDC2 基因全長ORF克隆
人 CFDP1 基因全長ORF克隆
人 COQ6 基因全長ORF克隆
人 CFL2 基因全長ORF克隆
人 COMMD3 基因全長ORF克隆
α半乳糖苷酶測試盒50管/24樣人補體因子I(CFI)免疫試劑盒進口、分裝
人補體因子H相關(guān)蛋白1(CFHR1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
人補體因子H(CFH)免疫試劑盒*直銷
人補體因子B前體(pre-CFB)免疫試劑盒進口、組裝
人補體片斷5b(C5b)免疫試劑盒進口、分裝
人補體片斷5a(C5a)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
人補體片斷4b(C4b)免疫試劑盒*直銷
人補體片斷3b(C3b)免疫試劑盒進口、組裝
人補體片斷3a(C3a)免疫試劑盒進口、分裝
人補體片段4d(C4d)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
人補體片段3d(C3d)免疫試劑盒*直銷
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
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