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商品屬性：

細胞培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二. 細胞處理:

1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

人膽酸(Cholic acid)免疫試劑盒*直銷

人G蛋白偶聯(lián)受體152(GPR152/PGR5)免疫試劑盒*直銷

牛胰島素(Insulin)免疫試劑盒進口、分裝

雞抗鏈球菌溶血素O(ASO)抗體(IgG)免疫試劑盒進口、分裝

大鼠肌紅蛋白(MYO/MB)免疫試劑盒進口、分裝

大鼠Apelin(APLN)免疫試劑盒進口、分裝

EC-MUG培養(yǎng)基（100g） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：100g

T1N0肉湯 英文名稱：TIN0 Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g

HBI腸桿菌科細菌生化鑒定條(GB) 英文名

小鼠乳腺上皮細胞Ranavirus蛙病毒LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phospho-VAV1(Tyr160)  磷酸化鳥苷酸轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體 規(guī)格: 0.1ml

West Nile Virus(WNV)西尼羅病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Annexin A9  膜粘連蛋白9抗體 規(guī)格: 0.2ml

Radix et caulis acanthopanacis senticosi刺五加LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周FOG1  GATA結(jié)合蛋白1伴侶蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Nosema spp.蜜蜂微孢子蟲通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周PCNA(1C11)  小鼠增細胞核抗原單克隆抗體 規(guī)格: 0.1ml

Mycobacterium avian禽結(jié)核分枝桿探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Rabbit Anti-chicken IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的兔抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml

Infectious Laryngotracheitis Virus(ILTV)雞傳染性喉氣管炎病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周VNN1  管非癥分子1抗體 規(guī)格: 0.2mlCCL21/6Ckine  淋巴細胞趨化因子CCL21抗體 規(guī)格: 0.1ml

Goose Astrovirus（GAstV）鵝星狀病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phospho-MCK10/CD167a/DDR1(Tyr513)  磷酸化神經(jīng)上皮酪激抗體（激10） 規(guī)格: 0.1mlGoat Anti-Bovine IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標記的羊抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml

Influenza Virus A甲型流感（）病毒H1亞型RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phospho-FADD(Ser194)  磷酸化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlMouse Anti-human IgM/AP  堿性磷酸（AP）標記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml

小鼠源性成分PCR檢測試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周URG4 (C terminal)  上調(diào)基因4抗體（C端） 規(guī)格: 0.2mlPhospho-Rb (Ser608)  磷酸化視網(wǎng)膜母細胞瘤相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Semen alpiniae  katsumadai草豆蔻染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周Renin  素/管緊張素形成Ren1抗體 規(guī)格: 0.1mlITPR3  5-三磷酸肌醇受體3抗體 規(guī)格: 0.2ml

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。