一、樣品 DNA 的制備

用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。

二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。

1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（最好用帶芯槍頭，下同）。

3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。

4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。

5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。

6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。

7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。

8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

服務(wù)流程：

接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱：藍(lán)舌病病毒型PCR熒光定量檢測試劑盒

英文名稱：Bluetongue Virus(BTV)8RTPCR

貨號(hào):BJ-P6466

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

運(yùn)輸：低溫

注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

實(shí)驗(yàn)外包:

基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、使用方法:

實(shí)驗(yàn)外包:

1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS、NMR

8.細(xì)胞及動(dòng)物模型：原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建

特點(diǎn)優(yōu)勢：

1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。

2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。

3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。

4.   實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。

5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。

藤黃八疊球菌

變形桿菌

植物乳桿菌

干酷乳桿菌

保加利亞乳桿菌

潮濕纖維單胞菌

產(chǎn)黃纖維單胞菌

黃色短桿菌

球型芽孢桿菌

大腸埃希氏菌

藍(lán)舌病病毒型PCR熒光定量檢測試劑盒卷曲同源物1(FZD1)ELISA試劑盒  Frizzled Homolog 1(FZD1)ELISA Kit

聚集蛋白聚糖(AGC)ELISA試劑盒  Aggrecan(AGC)ELISA Kit

巨軸索神經(jīng)蛋白(GAN)ELISA試劑盒  Gigaxonin(GAN)ELISA Kit

巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP5)ELISA試劑盒  Macrophage Inflammatory Protein 5(MIP5)ELISA Kit

巨噬細(xì)胞來源趨化因子(MDC)ELISA試劑盒  Macrophage Derived Chemokine(MDC)ELISA Kit

巨噬細(xì)胞集落刺激因子(MCSF)ELISA試劑盒  Colony Stimulating Factor 1, Macrophage(MCSF)ELISA Kit

巨肌酸激酶(MCK)ELISA試劑盒  Macro Creatine Kinase(MCK)ELISA Kit

痙攣性截癱蛋白11(SPG11)ELISA試劑盒  Spastic Paraplegia 11(SPG11)ELISA Kit

痙攣蛋白(SPAST)ELISA試劑盒  Spastin(SPAST)ELISA Kit

景天庚酮糖激酶(SHPK)ELISA試劑盒  Sedoheptulokinase(SHPK)ELISA Kit