一、樣品 DNA 的制備

用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。

二、制備 Cps 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。

1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（最好用帶芯槍頭，下同）。

3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。

4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。

5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。

6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。

7. NC 管中不加任何陽性對照。

8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標準曲線。

服務(wù)流程：

接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱：嗜血桿菌通用PCR熒光定量檢測試劑盒

英文名稱：Haemophilus spp.PCR

貨號:BJ-P6818

產(chǎn)品運輸：低溫運輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

運輸：低溫

注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

實驗外包:

基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、使用方法:

實驗外包:

1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS、NMR

8.細胞及動物模型：原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建

特點優(yōu)勢：

1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。

2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。

3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。

4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。

5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。

100次 RAPD PCR試劑盒（含銀染） RAPD PCR Kit 除PCR MagicMix 2.0需要-20℃保存外，其余成分可以保存牛肉膏進口、國產(chǎn)Meat extracts beef500克BR

1瓶 Ca Ski [CaSki]株 Ca Ski [CaSki] 低溫運輸和保存 0.625-40 ng/mL 大鼠肥大蛋白Ⅱ(Mcpt2)ELISA試劑盒

50T 金黃菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存

100mL MOBS Buffer,0.2M,pH8.0   MOBS Buffer,0.2M,pH8.0   常溫保存M9肉湯進口、國產(chǎn)M9 Broth250克BR

500U -DNA糖基化 Uracil DNA Glycosylase（UDG） -20℃保存 0.312-20 ng/mL 人神經(jīng)連接蛋白4,X連鎖(Neuroligin X)ELISA試劑盒

2 ug pcDNA3.1（+）/CAT pcDNA3.1（+）/CAT 低溫運輸，-20℃保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Laminin subunit alpha-3

100次 動物種屬鑒定PCR Mix 2（16S rDNA) Animal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Adipocyte plasma membrane-associated protein

2 ug pSilencer 3.0-H1 pSilencer 3.0-H1 低溫運輸，-20℃保存緩沖4-甲基傘形酮葡糖苷酸瓊脂進口、國產(chǎn)Buffered MUG Agar100克濾膜MUG法檢測食品中大腸菌數(shù)

1瓶 GBC-SD株 GBC-SD 低溫運輸和保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Urotensin-2B

10g 伊紅 Y, 醇溶性 Eosin Y  室溫陰涼干燥保存 0.156-10 ng/mL 病毒H5N1亞型(AIV-H5N1)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

100mL TAPS Buffer,0.2M,pH8.5  TAPS Buffer,0.2M,pH8.5  常溫保存溴甲紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基進口、國產(chǎn)BCP Glucase Peptone Water Medium250克用于壓力蒸汽滅菌效果評價

嗜血桿菌通用PCR熒光定量檢測試劑盒Hoechst Staining Kit  細胞凋亡染色試劑盒(細胞Hoechst染色)  100次

Apoptosis Inducers Kit  細胞凋亡陽性對照試劑盒  200次

DNA fragmentation Extraction Kit  細胞凋亡DNA斷裂片段提取試劑盒  50次

DNA Ladder Extraction Kit with Spin Column  細胞凋亡DNA Ladder提取試劑盒(柱式吸附)  50次

MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit  細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒（MTT法）  500次

LDH Cytotoxicity Assay Kit  細胞毒性檢測試劑盒(乳酸脫氫酶法)  100次|500次

WST-1 Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit  細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒(WST-1法)  100次|500次

Cell Counting Kit-8  CCK-8細胞增殖與毒性檢測試劑盒(WST-8法)  100次|500次|2500次|10000次

Enhanced Cell Counting Kit-8  增強型CCK-8試劑盒  100次|500次|2500次|10000次

Apoptosis and Necrosis Assay Kit  細胞凋亡與壞死檢測試劑盒  100次

Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit  Annexin V-FITC細胞凋亡檢測試劑盒  20次|50次