大鼠腹膜間皮細胞-上海邦景實業(yè)有限公司

貨號	BJ-X97486

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產(chǎn)品名稱	大鼠腹膜間皮細胞
規(guī)格	5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號	BJ-X97486

商品屬性：

名稱 大鼠腹膜間皮細胞

2.組織來源：腹膜組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

大鼠腹膜間皮細胞分離自腹膜組織；腹膜是存在于高等脊椎動物腹腔中的一層黏膜，主要由間皮細胞構(gòu)成，藉由結(jié)締組織的支持所形成的一層膜狀組織。腹膜包覆大部分腹腔內(nèi)的器官，能分泌黏液潤濕臟器的表面，減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液、淋巴和神經(jīng)組織經(jīng)由腹膜與外界相連；腹膜也具有吸收撞擊保護內(nèi)臟的效果。腹膜（peritoneum）為全身面積最大、配布最復(fù)雜的漿膜，由皮及少量結(jié)締組織構(gòu)成，薄而光滑，呈半透明狀。襯于腹、盆腔壁內(nèi)表面的腹膜稱為壁腹膜（parietal-peritoneum）或腹壁薄層；覆蓋腹、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜（visceral-peritoneum）腹膜或腹膜臟層。臟腹膜與壁腹膜互相延續(xù)、移行，共同圍成不規(guī)則的潛在性腔隙，稱為腹膜腔（peritoneal-cavity）。腹膜腔是臟、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙。腹膜腔內(nèi)有少量漿液，在臟器活動時可減少摩擦。腹膜間皮細胞屬于上皮組織中的單層扁平上皮，是覆蓋于腹膜表面的一層細胞。間皮細胞是構(gòu)成間皮的細胞，正常大小約為15-25微米，細胞常呈圓形或者卵圓形。其功用是提供潤滑，使器官與器官、器官與胸膜與腹膜間都能得到良好的保護，不會互相磨損受傷。而間皮所生產(chǎn)的潤滑和保護作用就是靠間皮細胞所分泌的物質(zhì)來達成，分泌物多半為細胞外基質(zhì)、玻尿酸類物質(zhì)。

5.方法簡介：

()實驗室分離的大鼠腹膜間皮細胞采用混合膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

()實驗室分離的大鼠腹膜間皮細胞經(jīng)PCK、Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號CM-R157

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)成纖維細胞樣

傳代特性可傳1-2代

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二. 細胞處理:

1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

圖片13.jpg

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

人6-羥多巴胺(6-OHDA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

人胰淀粉(PAMY)免疫試劑盒進口、組裝

人羥賴(Hyl)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

人軍團菌抗體IgM(LP Ab-IgM)免疫試劑盒進口、組裝

人成纖維細胞生長因子21(FGF21/UNQ3115/PRO10196)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)免疫試劑盒進口、組裝

綿羊非酯化脂肪酸(NEFA)免疫試劑盒進口、分裝

大鼠血小板衍生生長因子B(PDGF-B)免疫試劑盒進口、組裝

大鼠固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1A(SREBP-1Aows\system32\EhStorShell.dll

大鼠腹膜間皮細胞Macrobrachium Rosenbergii Nodavirus(MrNV)羅氏沼蝦諾達病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周CCL26/Eotaxin 3 嗜酸粒細胞趨化蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml

Radix pulsatillae白頭翁探針法PCR鑒定試劑盒中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-4周Goat Anti-Mouse IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的羊抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

Bonamia ostreae牡蠣包拉米蟲LAMP試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周EphB2/Eph receptor B2 酪蛋白激受體B2抗體規(guī)格: 0.1ml

E.coli大腸桿通用探針法熒光定量PCR試劑盒(含致病性和非致病性) 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周REG1A 胰島細胞再生因子ICRF抗體規(guī)格: 0.2ml

Flos campsis凌霄花LAMP鑒定試劑盒中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-4周Rabbit Anti-Guinea pig IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml

Haemophilus suis豬嗜血桿LAMP試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周T4/L-Thyroxine 甲狀素T4抗體規(guī)格: 0.2ml

Arthrinium spp.節(jié)菱孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周LRP5 脂蛋白受體相關(guān)蛋白5抗體規(guī)格: 0.1ml

Chrysomyxa arctostaphyli云杉帚銹病PCR試劑盒植物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周NALP6 富含亮重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體規(guī)格: 0.2ml

Torque Teno Sus Virus Type 2 (TTSuV-2)豬托克特諾病毒2型（豬細環(huán)病毒2型）LAMP試劑盒動物病原微生物檢測（科研用） 50次低溫負20度一年 2-4周SEMA6D 軸突導(dǎo)向因子SEMA6D抗體 0.2ml

Avian Hepatitis E Virus(aHEV)禽戊型肝炎病毒RT-LAMP試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周CPT1B 肉毒堿棕櫚?；D(zhuǎn)移1B抗體規(guī)格: 0.2ml

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。