rTEV蛋白酶

商品屬性：

商品介紹：

rTEV 蛋白酶（重組型）是經(jīng)過基因工程改造后的重組蛋白酶，該酶特異性識(shí)別 Glu-Asn- Leu-Tyr -Phe-Gln-Gly七氨基酸序列，并高特異性、高活性剪切(剪切位點(diǎn)在Gln-Gly之間)。該酶經(jīng) 6×His 標(biāo)簽純化而得(含組氨標(biāo)簽)，純度達(dá)99％，剪切反應(yīng)完畢后可通過 Ni-NTA Resin )去除。該酶在 4℃-30℃溫度、pH 范圍（6.0-8.5）反應(yīng)條件下均具有活性（見下表）。

活性定義：在 1×rTEV Buffer（50 mM，pH8.0, 0.5 mM EDTA,1mM DTT），30℃反應(yīng) 1h，剪切>85％的 3 μg 底物所需要的酶量定義為一個(gè)活性單位。
應(yīng)用：融合蛋白標(biāo)簽剪切去除。
儲(chǔ)存：長(zhǎng)期儲(chǔ)存-70℃，可儲(chǔ)存 2 年，-20℃可儲(chǔ)存 6 個(gè)月。
操作方法
1. 在 EP 管中配制如下反應(yīng)體系
融合蛋白 20 μg
20×rTEV Buffer 7.5 μl
0.1M DTT 1.5 μl
rTEV Protease 1-3 μl
ddH20 Up to 150 μl
2. 30℃孵育，在 1、2、4、6 小時(shí)分別吸出 30 μl 上述反應(yīng)液，置于單獨(dú)的 EP 管中。
3. 向上述 EP 管中加入 30 μl 2×SDS Loading Buffer，置于-20℃。
4. 樣品全部反應(yīng)完畢后，樣品煮沸 5 min，取 40 μl 進(jìn)行SDS-PAGE 分析。
5. 如融合蛋白要求低溫處理，可將反應(yīng)液置于 4℃，請(qǐng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，并增加 rTEV 酶用量。
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