產(chǎn)品名稱：阪崎腸桿菌熒光定量PCR試劑盒探針法

英文名稱：Enterobacter sakazaki

貨號(hào):BJ-P9522

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

運(yùn)輸：低溫

注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

服務(wù)流程：

接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

實(shí)驗(yàn)外包:

基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、使用方法:

特點(diǎn)：

1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。

2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。

3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。

4. 一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續(xù)污染。

5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。

6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

儲(chǔ)存條件：-20℃以下，有效期12個(gè)月。

一、樣品 DNA 的制備

用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。

二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。

1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（最好用帶芯槍頭，下同）。

3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。

4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。

5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。

6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。

7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。

8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

番紅O乙醇溶液(1%)100ml

沙黃/藏紅T水溶液(0.5%)100ml

孔雀石綠水溶液(1%)100ml

孔雀石綠水溶液(5%)100ml

沙黃/藏紅T水溶液(2%)100ml

乳酸酚棉藍(lán)染色液50ml|100ml

乳酚油100ml

硝酸鹽還原實(shí)驗(yàn)試劑2×50ml

六胺銀染色液(改良Grocott-橙黃G法)5×50ml

六胺銀染色液(改良Grocott-蘇木素法)6×50ml

阪崎腸桿菌熒光定量PCR試劑盒探針法大鼠 FCAMR 基因全長ORF克隆1.00671011110113E+19  熒光、比色、化學(xué)發(fā)光

大鼠 FCGRT 基因全長ORF克隆10016  熒光

大鼠 FCER1G 基因全長ORF克隆5001750113  比色

大鼠 CD31 基因全長ORF克隆50019  比色

大鼠 YWHAE 基因全長ORF克隆1001610135  熒光

大鼠 UCHL1 基因全長ORF克隆101491229812299  熒光

大鼠 CA13 基因全長ORF克隆50017  比色

大鼠 UCHL3 基因全長ORF克隆10155  比色

大鼠 CD4 基因全長ORF克隆10151  比色

大鼠 CCL27 基因全長ORF克隆細(xì)氧化應(yīng)激活性氧（ROS）比色法定量檢測試劑盒（羥自由基）  20次

大鼠 WFDC2 基因全長ORF克隆超氧化物歧化（SOD）活性檢測試劑盒  50次